МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ НАБУ В МОРКОВИ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

Транскрипт

1 Утверждены Минздравом СССР 8 июня 1987 г. N МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ НАБУ В МОРКОВИ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*> <*> Разработаны Т.В. Ушаковой, С.В. Тулуповой (ВНИИССОК). Краткая характеристика препарата приведена в Методических указаниях N Принцип метода. Метод заключается в проведении реакций превращения ряда промежуточных продуктов разложения набу в соединение типа M SO, экстракции препарата хлороформом, очистке экстракта перераспределением в несмешивающихся растворителях, дополнительной очистке хроматографией в тонком слое и количественном определении методом ГЖХ с применением ПИД. Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество M SO с ПИД 50 нг. Линейный диапазон определения нг. Нижний предел определения 0,01 мг/кг. Среднее значение определения в пробе 82,0%. Относительная ошибка определения (при p = 0,95, n = 5) составляет +/- 5,3%. Реактивы и растворы. Спирт этиловый 96-процентный. Универсальная индикаторная бумага. Пероксид водорода, 30-процентный

2

3 раствор. М-Хлорнадбензойная кислота х.ч. Гидроксид натрия х.ч. Сульфат натрия безводный х.ч. Хлороформ ч. Пластинки "Силуфол". Гипосульфит натрия ч.д.а. Хлорид натрия ч.д.а. Едкий натр, 0,05 н раствор. Этилацетат х.ч. Гексан х.ч. Стандартный раствор M SO холодильнике в (100 мкг/мл) хранится в течение недели. Приборы и посуда. Газожидкостный хроматограф "Хром-4" или другой с ПИД. Аппарат для встряхивания проб. Воронки химические и делительные (ВД-3-250). Испаритель ротационный ИР- 1М. Камера для хроматографирования (любой сосуд с притертой крышкой). Автоматические пипетки с дискретными объемами 5; 10; 20; 50; 100; 200; 500; 1000 мкл. Конические колбы на 100 и 250 мл. Микрошприц на 10 и 100 мкл. Стаканчики. Пробирки вместимостью 5 мл с конусообразным дном. Хранение проб. Пробы хранятся в течение 1-2 дней. Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта. Измельченную пробу моркови (50 г) помещают в коническую колбу на 250 мл, заливают 150 мл смеси этилового спирта с водой (1:1) и экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 1 ч. Полученный экстракт фильтруют через бумажный фильтр в колбу на 200 мл. Пробу и фильтр дважды промывают смесью спирта с водой. Далее подкисляют раствор до ph 3,0, промывают 0,5 мл 30-процентного раствора пероксида водорода и помещают в термостат при температуре 50 C на ч, после чего к инкубационной смеси добавляют 15 г хлорида натрия и 100 мл гексана. После встряхивания и разделения в делительной воронке гексановый слой отбрасывают. Препарат экстрагируют трижды хлороформом порциями по 10 мл. Объединенный хлороформный слой промывают 100 мл 0,05 н водного раствора едкого натра, содержащего 10 г хлорида натрия. Органическую фракцию фильтруют над безводным сульфатом натрия и затем выпаривают досуха на ротационном испарителе. Остаток растворяют в мг хлороформа и добавляют 20 мг М-хлорнадбензойной кислоты. Далее раствор помещают на 30 мин. в термостат при 30 C. После этого его промывают 30 мл 3- процентного водного раствора гипосульфита натрия, содержащего 3 г хлорида натрия. Водный слой раствора отбрасывают. Органический слой фильтруют над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют его до объема 0,1-0,2 мл. Экстракт количественно переносят на пластинку размером "Силуфол" 2 х 15 см (в пять точек по горизонтали на высоте 15 мм от края пластинки). Пробу хроматографируют дважды: в начале в системе этилацетат-гексан (3:1), а затем, после подсушивания, в системе гексан-ацетон (2:1). Величина R

4 f препарата при этих условиях хроматографирования составляет 0,20-0,25. Основываясь на этом, с пластинки счищают полосу силикагеля с R 0,18-0,40 f на воронку с бумажным фильтром, препарат в затем смывают ацетоном конусообразную пробирку вместимостью 5 мл. Растворитель в пробирке выпаривают досуха, и далее автоматической пипеткой приливают необходимое количество ацетона в зависимости от предполагаемого содержания гербицида. Условия хроматографирования. Хроматограф "Хром-4" с ПИД. Стеклянная колонка длиной 1,2 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5% OV-210 на хромосорбе N-AW-HCMS ( меш). Температура ( C): испарителя - 280, колонки Скорость потока азота 30 мл/мин., водорода - 34, воздуха мл/мин. Рабочая шкала электрометра 1:10. Время удерживания 9 мин. 36 с. В колонку хроматографа вводит аликвоту ацетонового раствора (5-10 мкл). Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения рассчитываемого пика с пиком, полученным при введении известного количества стандартного вещества, при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора. Количественную оценку пиков хроматограммы проводят по площади пика. Количество препарата в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле: C V S ст 2 X = , S V P ст 1 где: C - количество препарата во введенном в хроматограф стандартном ст растворе, мг; S и S препарата, - площади пика рабочей пробы и стандартного раствора

5 ст введенных в хроматограф, кв. мм; V - объем экстракта, введенный в хроматограф, мл; 1 V - общий объем экстракта после упаривания, мл; 2 P - масса анализируемой пробы, кг. Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.