ТЕМИРОВ ЮРИЙ ВИТАЛЬЕВИЧ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВТОРИЧНЫЕ МЕТАБОЛИТЫ-ПЕПТИДЫ, ОБРАЗУЕМЫЕ ТЕРМОФИЛЬНЫМИ ШТАММАМИ БАЦИЛЛ

Размер: px
Начинать показ со страницы:

Download "ТЕМИРОВ ЮРИЙ ВИТАЛЬЕВИЧ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВТОРИЧНЫЕ МЕТАБОЛИТЫ-ПЕПТИДЫ, ОБРАЗУЕМЫЕ ТЕРМОФИЛЬНЫМИ ШТАММАМИ БАЦИЛЛ"

Транскрипт

1 На правах рукописи ТЕМИРОВ ЮРИЙ ВИТАЛЬЕВИЧ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВТОРИЧНЫЕ МЕТАБОЛИТЫПЕПТИДЫ, ОБРАЗУЕМЫЕ ТЕРМОФИЛЬНЫМИ ШТАММАМИ БАЦИЛЛ Биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Пущино, 2004 г.

2 Работа выполнена в лаборатории организации белковых структур филиала Института биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН. Научные руководители: доктор химических наук, профессор кандидат химических наук Л.М. Винокуров. Официальные оппоненты: доктор химических наук Ю.Н. Уткин, кандидат биологических наук М.В. Донова. Ведущая организация: Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН. Защита состоится 2004 г. в н а заседании Специализированного совета Института биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН по адресу: , ГСП7, Москва, В437, ул. МиклухоМаклая, д. 16/10. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН. Автореферат разослан г. Учёный секретарь Диссертационного совета, доктор химических наук В.А. Несмеянов

3 Характеристика работы Актуальность проблемы. Поиск и изучение новых природных биологически активных веществ остаётся одним из важных направлений современной биологии и биотехнологии. Из многих вторичных метаболитов, образуемых микроорганизмами, наибольшее практическое значение попрежнему имеют антибиотики, широко применяемые в медицине. В то же время распространение антибиотикорезистентных форм микроорганизмов ограничивает эффективность традиционных антибиотических препаратов и требует разработки новых. В связи с этим всё большее внимание привлекают к себе низкомолекулярные пептиды, в том числе природного происхождения, нередко обладающие высокой антибактериальной, антифунгальной и противовирусной активностью. Микроорганизмы, населяющие биотопы с экстремальными условиями (высокой температурой, солёностью, сильнокислой или щелочной средой), могут оказаться источником необычных по структуре и свойствам метаболитов. Однако сведения о продукции экстремофильными бактериями и, в частности, термофилами, биологически активных низкомолекулярных соединений антибиотиков, сидерофоров и компонентов сигнальных систем (феромонов) к настоящему времени весьма немногочисленны, а сам вторичный метаболизм термофильных прокариот до сих пор остаётся малоизученным. Таким образом, весьма интересной научной и актуальной практической задачей является комплексное исследование термофильных и терморезистентных бактерий как продуцентов низкомолекулярных пептидных метаболитов, выделение и анализ этих соединений, а в перспективе установление генетических и биохимических механизмов их биосинтеза и закономерностей его регуляции, изучение взаимодействия путей первичного и вторичного метаболизма у прокариотэкстремофилов. Цель и задачи исследования. Представленная работа имела целью поиск, выделение, изучение свойств и установление структуры биологически активных вторичных метаболитовпептидов антибиотиков и сидерофоров, образуемых термофильными (терморезистентными) бактериями из рода Bacillus. В ходе исследования решались следующие задачи: 1) скрининг штаммов бактерийтермофилов для выявления среди них продуцентов антибактериальных соединений и хелаторов железа (сидерофоров); 2) идентификация штаммовпродуцентов; 3) изучение условий образования ими вторичных метаболитов; 4) очистка (в том числе в препаративных масштабах) пептидных антибиотиков и сидерофоров, образуемых термофильными бациллами, изучение свойств этих соединений; 1

if ($this->show_pages_images && $page_num < DocShare_Docs::PAGES_IMAGES_LIMIT) { if (! $this->doc['images_node_id']) { continue; } // $snip = Library::get_smart_snippet($text, DocShare_Docs::CHARS_LIMIT_PAGE_IMAGE_TITLE); $snips = Library::get_text_chunks($text, 4); ?>

4 5) определение активности выделенных антибиотиков в отношении различных видов микроорганизмов; 6) установление структуры изучаемых пептидных метаболитов с использованием современных методов анализа. Научная новизна и практическая ценность работы. Обнаружено, что ряд терморезистентных штаммов, идентифицированных как Bacillus licheniformis, образуют секретируемые антибиотики, подавляющие рост широкого круга грамположительных микроорганизмов. Разработан подход к выделению комплекса антибиотических метаболитов, продуцируемых штаммами В. licheniformis VK2 и VK21 при росте на различных углеродных и азотных субстратах. Изучена активность трёх антибиотиков штамма VK21 в отношении ряда бактерий, в том числе условно патогенных Staphylococcus aureus и Micrococcus luteus, установлен синергический эффект при совместном действии этих веществ. Анализ выделенных соединений показал, что они являются низкомолекулярными катионными пептидами, обогащены гидрофобными аминокислотами и, скорее всего, относятся к бактериоцинам, а не к продуктам внерибосомного пептидного синтеза. Определение Nконцевой последовательности одного из бактериоцинов, VK21A, не выявило его сходства с какимилибо ранее описанными антибактериальными пептидами бацилл. Изучение структуры и свойств выделенных антибиотиков является важным для последующего определения их практической ценности, в том числе возможности фармакологического использования этих соединений. Установлено, что термофильные бациллы способны к продукции сидерофоров при росте в условиях дефицита растворимого железа, а у В. licheniformis VK2 и VK21 наличие в среде марганца индуцирует три процесса: споруляцию, образование бактериоцинов и биосинтез катехольных соединений. Сидерофор, образуемый штаммом VK21, был выделен и идентифицирован как 2,3дигидроксибензоилглицилтреонин; сходный с ним метаболит известен у мезофильного вида В. subtilis, родственного В. licheniformis. Полученные результаты позволяют сделать вывод о перспективности поиска новых ценных природных соединений в экологической группе термофильных микроорганизмов, ранее практически не являвшейся объектом подобных исследований. Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на XIII и XIV зимней международной молодёжной научной школе (Институт биоорганической химии РАН, Москва, 2001 и 2002 г.г.), на 5й Пущинской конференции молодых учёных (2001 г.) и на отчётных конференциях филиала Института биоорганической химии РАН ( г.г). Структура и объём диссертации. Работа изложена на 144 страницах печатного текста (редактор Word, шрифт Times New Roman, кегль 12, интервал 2

5 1.5), включает в себя введение, обзор литературы, экспериментальную часть, объединяющую разделы «Материалы и методы» и «Результаты и обсуждение», выводы и список литературы из 334 ссылок. Диссертация содержит 18 таблиц и 24 рисунка. Объекты и методы исследования Бактериальные штаммы с обозначениями VK1, VK2, VK3, VK4, VK5, VK6, VK19 были предоставлены лабораторией биотехнологии Института биоорганической химии (ИБХ, Москва); VK17 и VK21 группой молекулярной биологии Института белка (Пущино); штамм В2101 и штаммы В. megaterium VKM41, Bacillus licheniformis B431, В432, В433 и Micrococcus luteus B1314 отделом Всесоюзной коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов (ИБФМ, Пущино); штаммы Escherichia coli C600 и Agrobacterium tumefaciens A281 лабораторией биотехнологии растений филиала ИБХ (Пущино); Pseudomonasputida 197, P. aeruginosa PAO1, Rhodococcus sp. SSI лабораторией биологии плазмид ИБФМ; штаммы Mycobacterium smegmatis 1171 и М. phlei 1291 лабораторией микробиологической трансформации органических соединений ИБФМ, штамм Staphylococcus aureus 209P кафедрой микробиологии Кубанской медицинской академии (Краснодар); штаммы В. subtilis 1621, В. pumilus 2001, В. amylolyquefaciens I Институтом пушного звероводства и кролиководства (Москва). Условия культивирования. Мезофильные бактерии выращивали на полноценных средах с оптимальным составом при температутре 30 С или 37 С. Термофильные и терморезистентные штаммы культивировали: в ходе тестирования их антибактериальной активности на полноценной среде Луриа Бертани и на минимальной солевой среде на основе фосфатного буфера (рн 7.3) с казаминовыми кислотами и сахарозой при 45 С или 55 С; в ходе изучения условий образования пептидных метаболитов и для их выделения при 45 С. Для выявления продукции метаболитов, связывающих железо, использовали минимальную среду, содержащую краситель хромазурол S (CAS). Идентификацию термофильных штаммов по совокупности физиологобиохимических признаков проводили, используя стандартные диагностические среды и методики, описанные в руководствах [Практикум по микробиологии (под ред. Н.С. Егорова), 1976; Bergey's Manual of Determinative Bacteriology, 1994]. Антибактериальные свойства термофильных штаммов определяли методами агаровых блоков и штриховых посевов в соответствии с руководством [Практикум по микробиологии (под ред. Н.С. Егорова), 1976]. Блоки диаметром 9 мм, вырезанные из агаризованной среды с суточной культурой бактерийтермофилов, помещали в углубления в агаре с клетками мезофильного 3

6 тестмикроорганизма (25*10 5 в 1 мл); чашки инкубировали при оптимальной для тестерных бактерий температуре до формирования плотного газона. Штриховой посев тестмикроорганизмов делали после 24 ч. роста терморезистентных штаммовпродуцентов на чашках. Антибиотическую активность образцов культуральной жидкости, продуктов её ферментативной обработки и фракций, полученных на этапах выделения антибиотиков, определяли стандартным методом диффузии в агаризованную среду, содержащую клетки соответствующего тестерного штамма. При тестировании образцов в 96луночных плашках опытные пробы содержали по 60 мкл ростовой среды, 12 мкл суспензии экспоненциальной культуры тестбактерий и до 120 мкл смеси минимальной ростовой среды с культуральной жидкостью в разном количестве. Каждый вариант теста ставился в трёх повторностях. Средние значения оптической плотности каждой серии и их стандартное отклонение (SD) вычисляли с помощью программы Microsoft Excel. Бактериолитическую активность супернатантов культур Bacillus licheniformis VK2 и VK21 и их фракций после ацетонового осаждения определяли в 96луночных плашках; каждая проба содержала по 60 мкл суспензии живых либо прогретых (95 С, 15 мин.) бактериальных клеток и соответствующие аликвоты тестируемых образцов. Каждый вариант теста ставился в трёх повторностях. Плашки инкубировали в течение 30 мин. при 37 С (в термостате, без перемешивания), измеряя перед этим оптическую плотность (при =630 нм) в лунках с контрольными пробами относительно пробы с оптическим стандартом, а после выдерживания плотность во всех лунках, определяя изменение её значений в опытных образцах относительно контрольных. Средние значения оптической плотности в каждой серии и их стандартное отклонение (SD) вычисляли с помощью программы Microsoft Excel. Для ферментативной обработки антибиотически активных бутанольных экстрактов штаммов В. lichemiformis VK2 и VK21 к высушенным образцам, растворённым в 10 мм ТрисHCl буфере (рн 7.8), добавляли растворы трипсина, химотрипсина (Calbiochem, Англия) и проназы (Serva, Германия) до конечной концентрации белка 1 мг/мл. Смеси инкубировали при 37 С, через 3, 6 и 9 ч. из них отбирали аликвоты по 100 мкл для определения антибактериальной активности методом диффузии в агар. Перед тестированием пробы прогревали 5 мин при 80 С для полной инактивации ферментов. В качестве контрольных использовали пробы, не содержащие ферментов и обработанные аналогичным образом, а также исходные образцы экстрагированных веществ. Высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) при выделении антибиотиков проводили на обращенофазовом носителе в системе буферных растворов: 30%й ацетонитрил в 30 мм ацетате аммония, рн 5.6 4

7 (стартовый) 80%й ацетонитрил в 30 мм ацетате аммония (элюирующий), концентрация которого линейно возрастала на 2% в минуту при скорости потока 4 мл/мин. При выделении сидерофора ВЭЖХ проводили в градиенте концентрации метанола в 0.1%й ТФУ при скорости потока 5 мл/мин, в режиме: 3045% метанола в течение 15 мин., далее до 65% в течение 60 мин. Минимальные ингибирующие концентрации (MIC) антибиотических пептидов VK21A, VK21B и VK21C определяли тестированием в 96луночных плашках серий двукратных разведений растворов веществ в 20%м метаноле. Каждый вариант теста ставился в четырёх повторностях. За MIC антибиотика для данного штамма принимали ту величину, при которой отмечалась задержка роста бактерий (10% и более) по сравнению с контрольными лунками (содержали 20%й метанол) при сопоставлении средних значений оптической плотности во всей серии проб. Тесты с CASреактивом на наличие веществ, связывающих ионы Fe 3, проводили, как описано в работе [Anal. Biochem V. 160 (1). P ]. Реактив содержал 150 мкм хромазурола S, 15 мкм FeCb и 600 мкм цетавлона, растворённых в 0.5 М буфере шшеразиннс1, рн 5.6. При тонкослойной хроматографии (ТСХ) для проявления пептидных соединений использовали свободный хлор (продукт реакции НС1 с КМпО 4 ) с последующей обработкой пластинок раствором смеси крахмала и KJ (по 1%), а для окрашивания катехолов свежеприготовленную смесь (1:1) 1%х растворов цитрата железааммония и гексаферроцианида (III) калия. Для колориметрического измерения концентрации катехольных соединений в культуральной жидкости использовали реакцию с цитратом железааммония и 1,10 фенантролином [Anal. Biochem V. 133 (1). P ]. Поглощение проб измеряли при длине волны 510 нм на спектрофотометре Ocean Optics с программным пакетом OOI Base (США). В качестве стандарта для построения калибровочных графиков и определения молярного коэффициента экстинкции использовали 2,3дигидроксибензойную кислоту (Fluka, Швейцария). Биологический тест сидерофора на восстановление им роста клеток штаммапродуцента проводили методом диффузии в агар. В чашку Петри заливали 10 мл агаризованной минимальной среды, содержащей 300 мкг/мл этилендиаминтетраацетата (ЭДТА) и 24*10 6 /мл клеток штамма В. lichemiformis VK21. Раствор сидерофора SVK2I ДЛЯ теста готовили в 20 мм калийфосфатном буфере (рн 6.5). В лунки наносили проверяемые образцы объёмом по 50 мкл. Чашки инкубировали при 45 С. Функциональную активность железосвязывающих метаболитов выявляли по наличию роста бактерий в зонах вокруг лунок. 5

8 Результаты и их обсуждение Штаммы бактерийтермофилов и образование ими метаболитов с антибиотическими свойствами. Штаммы облигатнотермофильных и терморезистентных бактерий из коллекции лаборатории организации белковых структур филиала Института биоорганической химии РАН первоначально были охарактеризованы по их основным характеристикам: морфологии клеток, типу клеточной стенки (Грамтест), способности к образованию спор, отношению к кислороду, оксидазной и каталазной активности; также был изучен рост этих бактерий при различной температуре (табл. 1). Полученные результаты позволили с полной определённостью отнести терморезистентные штаммы VK2, VK21, VK17, VK19, В2101 и облигатнотермофильные штаммы VK1 и VK4 к роду Bacillus, многие представители которого образуют антибактериальные метаболиты; для выявления возможных продуцентов антибиотиков все они были тестированы на антимикробную активность в отношении различных видов бактерий. При скрининге, проведённом методом агаровых дисков с выращиванием термофилов в толще полноценной агаризованной среды при 55 С, восемь штаммов терморезистентных бацилл подавляли рост грамположительных бактерий, но не проявляли активности в отношении грамотрицательных тестштаммов (табл. 2). Антибиотически активные штаммы Bacillus spp. VK2, VK21, VK17, VK19, В2101 и В. licheniformis B431 были тестированы также методом перпендикулярных штрихов при росте на агаризованной минимальной среде с казаминовыми кислотами и сахарозой. В этом варианте бациллы показывали те же антимикробные свойства, хотя и менее выраженные. В итоге два наиболее активных штамма Bacillus spp. VK2 и VK21 были отобраны для изучения образуемых ими антибактериальных продуктов. Видовую принадлежность всех терморезистентных бацилл продуцентов антибиотиков определяли с помощью стандартных физиологобиохимических тестов (табл. 3). По совокупности полученных результатов штаммы VK2, VK21, VK17 и В2101 были отнесены к виду В. licheniformis, а отличавшийся от них штамм VK19 предположительно к В. subtilis. Закономерности продукции антибиотиков при различных условиях культивирования штаммовпродуцентов. В предварительных экспериментах штаммы В. licheniformis VK2 и VK21 выращивали в пробирках с жидкой минимальной средой на основе фосфатного буфера (рн 7.3), содержащей различные источники азота и углерода (табл. 4); отмечали особенности роста бактерий, уровень антибактериальной активности в супернатантах их культур и образование ими эндоспор после 24 ч. культивирования. При росте на сахарозе без добавления микроэлементов оба штамма 6

9 Таблица 1 Основные характеристики термофильных и терморезистентных штаммов бактерий, использованных в работе Штаммы Споры Грамтест Анаэробный рост Оксидаза Катал аза Рост при температуре VK1 VK2 VK3 VK4 VK5 VK6 VK19 VK17, слабый VK21 В2101 Bacillus licheniformis В431* Bacillus licheniformis B432* Bacillus licheniformis B433* ^Указанные штаммы использовали в качестве контрольных. ограниченно использовали аммонийный и нитратный азот, хотя активность в этих культурах была неожиданно высокой, сравнимой с активностью бактерий, выращенных на сахарозе с казаминовыми кислотами в качестве азотного субстрата (табл. 4). Эффект стимуляции биосинтеза вторичных метаболитов у 7

10 микроорганизмов в условиях лимита по основным элементам питания углероду, фосфору и особенно азоту хорошо известен, хотя механизмы этого явления во многом остаются неясными до сих пор. Рост продуцентов на казаминовых кислотах при замене сахарозы на глицерин был весьма слабым; антибиотически активной при этом была только культуральная жидкость штамма VK21 после 24 ч. культивирования. В культурах штаммов VK2 и VK21 на гидролизате казеина антибиотические продукты отсутствовали. Уровень активности в ранних стационарных культурах (8 ч.) на ацетате и цитрате был относительно высоким у В. licheniformis VK21 и довольно низким у штамма VK2. Было также отмечено, что при выращивании на углеводных субстратах бактериипродуценты почти не образовывали спор, тогда как рост на ацетате сопровождался споруляцией у обоих штаммов, на цитрате же более активное спорообразование наблюдалось у штамма VK2. Антагонистические свойства терморезистентных штаммов Таблица 2 Тестбактерии Escherichia coli С600 Pseudomonas putida 197 P. aeruginosa PAO1 Agrobacterium tumefaciens A281 Bacillus megaterium VKM41 Rhodococcus sp. SSI Micrococcus luteus В1314 VK2 В432 нд нд VK21 / / Зоны подавления роста 1 * В2101 VK17 VK19 В431 / / В433 / ^Термофильные бактерии культивировали в толще агаризованной среды ЛуриаБертани при 55 С в течение суток. () диаметр зоны лизиса больше 15 мм; () от 13 до 15 мм; (/) меньше 13 мм; () зона лизиса отсутствует; (нд) тест не проводили. 8

11 Таблица 3 Идентификация терморезистентных штаммов продуцентов антибиотиков Виды тестов Образование кислоты из Dглюкозы Lарабинозы Dксилозы Dманнитола Гидролиз крахмала желатина казеина Рост на 5% NaCl 7%NaCl 10%NaCl Восстановление N(V до NO 2 " Утилизация цитрата пропионата Реакция Фогеса Проскауэра (VP) рн культуры в реакции VP VK2 слабо >6 VK21 слабо >6 VK17 слабо >6 Штаммы VK19 >6 В2101 слабо >6 Bacillus licheniformis В433* слабо >6 "Штамм использовали в качестве контрольного Для нормального формирования бациллами эндоспор необходимы двухвалентные катионы, в особенности. Добавление в среду сульфата марганца (60 мкм) способствовало интенсивному росту В. licheniformis VK2 и УК21 насреде с и но на уровень продукции ими антибиотиков в этих условиях существенно не влияло. Споруляция в присутствии была отмечена в культуре штамма VK21 на нитратном азоте (5 10%); у В. licheniformis VK2 в этих условиях споры не обнаруживались, а на аммонийном азоте оба 9

12 Таблица 4 Уровень роста и антибактериальной активности (диаметр зон подавления роста тестштамма, мм) супернатантов культур Bacillus licheniformis VK2 и VK21 в минимальной среде без добавления микроэлементов Источники азота / углерода* Казаминовые кислоты / сахароза Гидролизат казеина / сахароза рост 2,29 2,00 Штамм VK2 8 ч. активность рост 12,75 2,01 н/а** 1,72 24 ч. активность 12,75 н/а рост 2,18 1,80 Штамм VK21 8 ч. активность рост 16,08 2,09 н/а 1,10 24 ч. активность 13,58 н/а /сахароза 0,84 15,50 1,52 15,75 0,88 17,00 1,40 16,5 КЖ)з / сахароза 0,34 13,75 0,84 16,13 0,46 н/а 0,69 15,75 Казаминовые кислоты / глицерин Казаминовые кислоты / ацетат Казаминовые кислоты / цитрат 0,68 0,92 2,04 н/а 12,25 9,00 0,70 2,12 1,30 н/а 14,75 9,75 0,66 1,24 1,60 н/а 16,50 17,25 0,76 1,24 0,96 14,25 14,75 13,00 *Основной состав среды (г/л): 1; КС ; д о б а в л я л и (г/л): казаминовые кислоты (Difco) 1.5; гидролизат казеина (Sigma) 1.5; сахарозу 4; глицерин 4.3; ацетат калия (безводный) 6.93; цитрат калия (дигидрат) Антибиотический тест культуральной жидкости проводили методом диффузии в агар с клетками Bacillus megaterium VKM41. По обоим параметрам приведены усреднённые данные из двух независимых экспериментов; стандартное отклонение (SD) во всех случаях не превышало ** (н/а) нет активности. 10

13 Таблица 5 Уровень роста и антибактериальной активности (диаметр зон подавления роста тестштамма, мм) супернатантов культур Bacillus licheniformis VK2 и VK21 при выращивании в минимальной среде с добавлением 60 мкм Источники азота / углерода* Казаминовые кислоты / сахароза Гидролизат казеина / сахароза рост 2,11 3,84 Штамм VK2 8 ч. активность рост 14,75 2,12 17,50 3,12 24 ч. активность 14,08 14,75 рост 2,70 2,80 Штамм VK21 8 ч. активность рост 17,38 1,83 17,00 2,70 24 ч. активность 13,58 12,50 / сахароза 4,04 15,75 2,80 17,25 2,40 18,50 2,24 18,00 /сахароза 0,91 17,25 2,36 16,25 0,80 11,00 1,27 14,75 Казаминовые кислоты / глицерин Казаминовые кислоты / ацетат Казаминовые кислоты / цитрат 2,08 1,68 2,36 15,00 9,00 11,75 2,00 2,24 1,90 14,00 11,25 12,00 1,24 1,36 2,32 10,5 17,00 17,25 2,16 1,78 1,04 13,50 14,50 11,75 *Состав сред и метод теста антибиотической активности соответствуют указанным в табл. 4. По обоим параметрам приведены усреднённые данные из двух независимых экспериментов; стандартное отклонение (SD) во всех случаях не превышало

14 продуцента практически не образовывали спор после 24 ч. культивирования с марганцем. В то же время в средах, содержащих глицерин с казаминовыми кислотами и сахарозу с гидролизатом казеина, наличие марганца не только усиливало рост бактерий, но и стимулировало продукцию ими антибактериальных метаболитов (табл. 4 и 5) и спорогенез. Последний эффект также был отмечен в культурах штаммовпродуцентов на сахарозе с казаминовыми кислотами: при культивировании на этих субстратах в присутствии марганца уровень споруляции возрастал примерно на порядок (табл. 6). В культурах с ацетатом и цитратом спорообразование происходило достаточно интенсивно вне зависимости от добавления в среду. Активация биосинтеза некоторых антибиотиков у бацилл тесно связана с начальными этапами дифференцировки бактериальных клеток, в завершение которой формируется зрелая эндоспора. Культуры В. licheniformis VK2 и VK21 в среде с сахарозой и казаминовыми кислотами показали наибольшее сходство между собой по интенсивности роста и уровню антибактериальной активности, причём значения обоих этих параметров были достаточно высоки как при отсутствии так и при его добавлении в среду. Однако ионы марганца в таких условиях явно стимулировали спорообразование у обоих штаммов. Была дополнительно изучена корреляция между ростом бактерий на указанных субстратах (в колбах) и образованием ими антибиотиков. Без марганца активность Таблица 6 Относительное содержание зрелых спор в суточных культурах штаммов Bacillus licheniformis VK2 и VK21 в минимальной среде с казаминовыми кислотами и сахарозой, содержащей и не содержащей марганец Содержание эндоспор, % от общего числа клеток* опыта Штамм VK2 Штамм VK21 без MnSO 4 60 мкм MnSO 4 без MnSO 4 60 мкм MnSO 4 1 1,9 9,0 1,0 10,0 2 1,3 25,0 1,4 12,0 *Определяли сравнением числа колоний, выросших в посевах разведённых суспензий суточных культур бацилл, исходно прогретых (15 мин. при 95 С) и не подвергавшихся прогреву. Приведены усреднённые данные из трёх подсчётов. 12

15 супернатантов культур продуцентов достигала максимального уровня в начале стационарной фазы роста и далее на её протяжении оставалась практически неизменной (рис. 1, А, Б). Количество спор после суток культивирования не превышало в этом случае 1 3%. Добавление не оказывало выраженного влияния на характер роста бактерий, но существенно изменяло динамику антибиотической активности в их культурах: содержание активных метаболитов в культуральной жидкости достигало выраженного максимума при переходе продуцентов к стационарной фазе роста. В ходе созревания спор уровень активности постепенно снижался (рис. 1, В, Г), значительно уменьшаясь к периоду массового появления в культурах спорующихся клеток. После 24 ч. роста в этих условиях культуры обоих штаммовпродуцентов содержали 50 60% зрелых спор. Определение бактериолитических свойств штаммов В. licheniformis VK2 и VK21. Антибактериальная активность некоторых бактерий, в том числе термофильных, нередко обусловлена продукцией ими комплекса ферментов, лизирующих стенки живых клеток других видов микроорганизмов. Супернатанты культур В. licheniformis VK2 и VK21, выращенных без добавления до начала стационарной фазы роста, были тестированы на литические и антибиотические свойства в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий. Живые и прогретые (95 С, 20 мин.) суспензии клеток тестмикроорганизмов инкубировали с образцами культуральной жидкости; о степени лизиса судили по изменению оптической плотности проб в сравнении с контрольными. Было установлено, что ни живые, ни убитые прогревом клетки Micrococcus luteus не лизировались супернатантами культур термофильных бацилл, а клетки Bacillus megaterium лишь в малой степени подвергались лизису культуральной жидкостью штамма VK21, но не VK2 (рис. 2, А, Б). В то же время культуральная жидкость штамма VK21 при тестировании её антибиотической активности эффективно подавляла рост микрококка и немногим слабее рост В. megaterium (рис. 2, В). Супернатант культуры В. licheniformis VK2 также оказывал антибиотическое действие на эти бактерии, хотя его ингибирующая концентрация была более высокой (рис. 2, В). С другой стороны, прогретые клетки грамотрицательных штаммов, Pseudomonas putida 197 и Escherichia coli С600, активно лизировались пробами культуральной жидкости продуцентов, тогда как на рост живых культур этих бактерий она не влияла (данные не приведены). Полученные результаты показали, что исследуемые термофильные бациллы действительно секретируют ферменты, гидролизующие компоненты бактериальных клеток, однако антагонистические свойства штаммов в основном обусловлены продукцией ими антибиотических метаболитов. 13

16 Рис. 1. Динамика роста (А 620 ) и образования активных продуктов в культурах Bacillus licheniformis VK2 (А, В) и VK21 (Б, Г) в минимальной среде без микроэлементов (I) и в среде с добавлением 60 мкм MnSO 4 (II). Приведены усреднённые данные из трёх независимых экспериментов, г 2 квадрат радиуса зон подавления роста тестштамма Bacillus megaterium VKM41. 14

17 Рис. 2. Результаты определения литической активности супернатантов культур Bacillus licheniformis VK2 (А) и VK21 (Б) в отношении грамположительных тестбактерий; (В) подавление роста этих же бактерий культуральной жидкостью штаммовпродуцентов. В литическом тесте: К контрольные пробы (суспензии живых или прогретых клеток в минимальной ростовой среде); в опытные пробы вносили культуральную жидкость до: 1 2.5%; 2 5%; 3 10%; 4 20% от общего объёма (120 мкл). В антибиотическом тесте: К 0% культуральной жидкости; %; 2 2.5%; 3 5%; 4 10%; 5 20% от общего объёма пробы (120 мкл). Тесты и измерение оптической плотности проводили в стандартных 96луночных плашках. Значения стандартного отклонения (SD) во всех случаях не превышали

18 Анализ супернатантов культур и выделение индивидуальных антибиотиков. Антибактериальные продукты В. licheniformis VK2 и VK21 выделяли из концентрированных супернатантов их культур в среде с казаминовыми кислотами и сахарозой (как без марганца, так и с добавлением 60 мкм ), снятых в начале стационарной фазы роста. После однократной экстракции нбутанолом антибиотические метаболиты полностью переходили в органическую фазу, а добавление к культуральной жидкости ацетона осаждало из неё высокомолекулярные компоненты. Эти осадки проявляли высокую литическую активность, тогда как антибактериальная активность оставалась в надосадочных растворах. Образцы исходной культуральной жидкости и их бутанольные экстракты сохраняли своё антибиотическое действие после кипячения в течение 15 мин. Экстрагированные метаболиты были также устойчивы в растворах с диапазоном значений рн от 2.2 до 9.0, но инактивировались в сильнощелочной среде. Обработка трипсином и химотрипсином не влияла на антибиотические свойства экстрактов, тогда как инкубация с проназой почти полностью инактивировала их. Было предположено, что антибиотики штаммов B. licheniformis VK2 и VK21 являются низкомолекулярными пептидами, структурные особенности которых могут защищать их от протеолиза. Компоненты смеси разделяли обращённофазовой высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) с последующим тестированием антибактериальной активности собранных фракций; общая схема выделения приведена на рис. 3. Неожиданным оказалось то, что у двух штаммов наличие в среде стимулировало не только споруляцию, но и образование ими сходных либо даже идентичных антибиотических соединений, судя по характеру хроматографических профилей и высоте пиков, соответствующих индивидуальным антибиотикам (рис. 3). При этом влияние марганца на соотношение между уровнем роста и общей активностью в культурах обоих термофильных штаммов в целом не было существенным бациллы секретировали сложную смесь антибактериальных продуктов, из которых лишь несколько удалось выделить описанным методом. Антибиотические свойства метаболитов штамма В. licheniformis VK21. Спектр активности соединений, обозначенных как VK21A, VK21B и VK21 C, определяли методом диффузии их растворов в плотную среду с клетками тестируемых бактериальных штаммов. В концентрации 200 мкг/мл каждый из антибиотиков подавлял рост грамположительных бактерий: Bacillus subtilis 1621, В. pumilus 2001, В. megaterium VKM41, В. amyloliquefaciens I, Staphylococcus aureus 209P, Micrococcus luteus В1314. Ha Rhodococcus sp. SSI, Mycobacterium smegmatis 1171 и М. phlei 1291 действовал только антибиотик VK21A, а штамм В. licheniformis B431 был устойчив ко всем трём веществам. Было обнаружено 16

19 Рис. 3. Схема выделения антибиотических метаболитов В. licheniformis VK2 и VK21 и хроматограммы экстрактов культуральной жидкости продуцентов, выращенных в среде с 60 мкм MnSO 4 (верхние профили на каждом рисинке) и без него (нижние профили). А, В и С антибиотически активные фракции. 17

20 также синергическое действие антибиотика VK21A с VK21B, либо же с VK21C: смеси их растворов с конечной концентрацией по 20 мкг/мл каждого показывали высокую активность в отношении В. megaterium VKM41 и особенно Micrococcus luteus В1314, а смеси этих метаболитов в концентрации по 100 мкг/мл эффективно подавляли рост остальных перечисленных тестштаммов. На рост грамотрицательных бактерий Е. coli C600, Pseudomonas aeruginosa PAO1, Ps. putida 197, Agrobacterium tumefaciens A281 антибиотики не влияли. Значения их минимальных ингибирующих концентраций для наиболее чувствительных микроорганизмов приведены в табл. 7. Структурный анализ соединений VK21A, VK21B и VK21C. Тонкослойной хроматографией (ТСХ) очищенных метаболитов штамма В. licheniformis VK21 с проявлением хлором и смесью растворов крахмала и KJ было подтверждено, что выделенные вещества являются пептидами. При проявлении раствором родамина 6G пятна флуоресцировали в ультрафиолете, свидетельствуя о гидрофобном характере соединений, однако красителем Судан чёрный В они не окрашивались, что позволило предположить отсутствие в составе этих антибиотиков липидных групп. По данным MALDI массспектрометрии, соединение VK21A имеет молекулярную массу 3253±2 Da; соединение VK21B 3020±1 Da; VK21C 3038±1 Da. Аминокислотный анализ 1 антибиотиков показал, что все они являются пептидами, обогащенными гидрофобными аминокислотами, а также содержат катионные остатки аргинин и (или) лизин, причём соединения VK21B и VK21 С весьма сходны между собой по составу, но отличаются от VK21A (табл. 8). Все эти данные указывали на то, что выделенные метаболиты, вероятно, относятся к бактериоцинам пептидам, имеющим собственные гены, а не к продуктам ферментов, осуществляющих внерибосомный пептидный синтез (пептидилсинтетаз). Автоматическим секвенированием по Эдману 2 удалось определить Nконцевой фрагмент соединения VK21A как GNNGYLKEKMPPS, но далее эта последовательность не прочитывались, а два других антибиотика не поддавались секвенированию. Анализ приведённой последовательности с использованием программы BLAST и баз данных первичных структур антимикробных пептидов не выявил её гомологии с какимилибо известными пептидными антибиотиками; также не удалось обнаружить опубликованных сообщений об антибактериальных пептидах бацилл, сходных по составу и по свойствам с исследованными в данной работе. Не исключено, что метаболиты, образуемые терморезистентным штаммом В. licheniformisvk21, являются неизвестными ранее бактериоцинами, комплекс 1 Аминокислотный анализ проводили в лаборатории химии пептидов Института биоорганической химии РАН. 2 Секвенирование проводили в Учебнонаучном центре ИБХ РАН. 18

21 Таблица 7 Антибактериальная активность пептидных метаболитов, образуемых штаммом Bacillus licheniformis VK21 Тестируемые бактериальные штаммы Bacillus subtilis 1621 В. amyloliquefaciens I В. pumilus 2001 В. megaterium VKM41 Micrococcus luteus B1314 Staphylococcus aureus 209P Rhodococcus sp. SSI Минимальные ингибирующие концентрации (MIC) антибиотиков и их смесей*, мкг/мл VK21A 60 >8 > VK21B нд VK21C 60 > нд АВ поз по 0,2 по 6 по 0,375 по 0,013 поз по 0,5 АС поз по 0,4 по 6 по 0,375 по 0,013 поз по 0,5 * Одинаковые весовые концентрации в смесях веществ соответствуют их эквимолярным соотношениям; (нд) определение не проводили. которых подавляет микроорганизмов. развитие широкого круга грамположительных Образование катехольного сидерофора штаммом В. licheniformis VK21. Облигатнотермофильные и терморезистентные штаммы бацилл из лабораторной коллекции (см. табл. 1), растущие на агаризованной минимальной среде с комплексом красителя хромазурола S (CAS) и Fe 3 с цетавлоном, изменяли окраску индикатора, что говорило о секреции ими соединений, специфически связывающих ионы железа сидерофоров. При добавлении в среду 60 мкм MnSC>4 цветные зоны вокруг колоний В. licheniformis B431, В432 и VK21 заметно увеличивались, у остальных штаммов существенно не изменялись. Культуральную жидкость В. licheniformis VK2 и VK21, выращенных в жидкой минимальной среде (в ходе изучения продукции ими антибиотиков), тестировали также CASреактивом на присутствие сидерофоров. Положительную реакцию 19

22 Таблица 8 Аминокислотный состав антибиотических метаболитов штамма Bacillus licheniformis VK21 давали только супернатанты культур, содержавших марганец. Все образцы культуральной жидкости экстрагировали этилацетатом с подкислением НС1 (до 0.2 н.) либо без этого; органическую фазу анализировали тонкослойной хроматографией. Экстракты супернатантов с содержали вещества, которые связывали железо в составе CASреактива, давали синее окрашивание с солями железа (III) и флуоресцировали в ультрафиолете (табл. 9). Все эти свойства характерны для катехольных сидерофоров, образуемых многими видами бактерий, но не описанных прежде у В. licheniformis. Пятна с голубой флуоресценцией, слабо проявляемые CASреактивом, соответствовали по величине и свечению 2,3дигидроксибензойной кислоте (DHB). Другое катехольное соединение, флуоресцировавшее зелёным светом, предположительно было сидерофором 20

23 Таблица 9 ТСХанализ* метаболитов штаммов Bacillus licheniformis VK2 и VK21, экстрагированных этилацетатом из подкисленных образцов культуральной жидкости Окрашивание пятен*** Штаммыпродуценты Рост без марганца Росте добавлением MnSO 4 VK2 VK21 VK2 VK21 Rf 0,83 0,97 0,84 0,90 0,83 0,97 0,90 0,84 Флуоресценция в УФ**, светлоголубая, голубая, светлозелёная, голубая CASреактив / / Цитрат железааммония гексацианоферрат (III) калия / С1 2 с проявлением крахмалом KJ * Хроматографию проводили на пластинках Cellulose (Merck) в системе: нбутанол 12:3:5; **() пятна выглядят темными в УФсвете; *** (/) окрашивание пятен слабое. В. licheniformis VK21, образование которого зависело от наличия в культуре продуцента. Колориметрическим анализом образцов культуральной жидкости было показано, что катехольные соединения накапливались в ходе активного роста штамма VK21, достигая максимальной концентрации к началу стационарной фазы. В среде, содержавшей 50 мкм FeCl 3, уровень продукции сидерофора сильно снижался (рис. 4), что подтверждалось и тестом с CASреактивом, указывая на контролируемый механизм биосинтеза метаболитахелатора. Активное образование катехолов В. licheniformis VK21 было возможно 21

24 Рис.4. Рост штамма Bacillus Hcheniformis VK21 в минимальной среде и образование им катехольных метаболитов. рост бактерий в С2Мп без железа (1) и с добавлением образование катехолов в среде без железа (3) и с добавлением 50 мкм FeCl 3 (4). 5 уровень продукции катехолов при росте бактерий в отсутствие марганца. Приведены усреднённые данные из трёх независимых экспериментов. при наличии в среде как минимум 50 нм и полностью ингибировалось растворимым железом в концентрации от 2 мкм и выше. Увеличение концентрации (до 200 мкм) не оказывало влияния на уровень продукции сидерофора и не уменьшало ингибирующий эффект Выделение, анализ и установление структуры сидерофора В. Hcheniformis VK21. Схема препаративного выделения железосвязывающего метаболита, условно названного приведена на рис. 5. Полученный препарат был очищен обращёнофазовой ВЭЖХ с элюцией градиентом концентрации метанола в 0.1%й трифторуксусной кислоте. Проба с CASреактивом показала наличие хелатора железа во фракции, соответствующей пику, выходящему со временем удержания 45 мин. (рис. 5). Дополнительный анализ очищенного вещества с использованием ТСХ на целлюлозных и силикагельных пластинках в различных системах растворителей подтвердил его принадлежность к классу катехольных сидерофоров, а проявление пятна при обработке хлором и смесью растворов крахмала и KJ позволило предположить наличие пептидной связи в его молекуле. Функциональная активность метаболита как компонента системы активного транспорта железа у его продуцента была подтверждена тестом, в котором вещество восстанавливало рост клеток самой В. Hcheniformis VK21 при подавлении их хелатором ЭДТА. 22

25 Рис. 5. Схема выделения сидерофора Bacillus licheniformis VK21 с очисткой обращённофазовой ВЭЖХ. фракция железосвязывающего метаболита. 23

26 Рис. 6. УФспектр сидерофора в метаноле. Концентрация вещества 55 мкм. Рис. 7. Структура сидерофора по данным спектроскопии ЯМР. Измерение оптического спектра сидерофора в метанольном растворе показало наличие максимумов поглощения при =248 и 315 нм (рис. 6), а сам вид спектральной кривой соответствовал характеру спектров известных катехольных сидерофоров, где присутствие остатка 2,3DHB также обусловливает поглощение в областях длин волн в районе 320 нм и 250 нм. 24

27 Определение аминокислотного состава показало наличие в молекуле метаболита остатков глицина и треонина в соотношении, близком 1:1. На основании анализа ЯМРспектров 3 COSY, TOCSY, NOESY, HMQC, и НМВС было проведено полное отнесение сигналов образца которое соответствовало формуле соединения, приведённой на рис. 7. Титрующаяся группа исследуемого вещества имела значение рк, равное 3.22 ± 0.02, что дополнительно указывало на её принадлежность Сконцевому остатку треонина. Таким образом, сидерофор В. licheniformis VK21 отличался по структуре от ранее описанного бациллибактина В. subtilis, в котором три аналогичных звена 2,3дигидроксибензоилглицилтреонина формируют лактонный цикл. 1 Спектроскопию ЯМР проводили в лаборатории инструментальных методов анализа ИБХ РАН. 25

28 Выводы 1. Исследованные термофильные бациллы способны к продукции антибактериальных и железосвязывающих метаболитов. Штаммы В. licheniformis VK2 и VK21 при росте на разных источниках углерода и азота активно секретируют комплекс низкомолекулярных антибиотиков, подавляющих рост грамположительных бактерий. Добавление к культуре солей марганца индуцирует споруляцию у этих штаммов, а также продукцию ими катехольных сидерофоров и трёх антибиотических пептидов. Экзоферменты, образуемые бациллами, практически не лизируют живые бактериальные клетки. 2. Пептидные антибиотики В. licheniformis VK2 и VK21 относительно устойчивы к высокой температуре, низкому рн среды и к ферментному протеолизу. Показана активность метаболитов штамма VK21 в отношении широкого круга микроорганизмов, в том числе Staphylococcus aureus и Micrococcus luteus. Антибиотик VK21A действует в синергизме с VK21B и VK21C, при этом минимальные ингибирующие концентрации индивидуальных веществ снижаются на 12 порядка в их смесях. 3. Метаболиты VK21A VK21B и VK21C являются гидрофобными катионными пептидами и относятся к группе бактериоцинов. Частично определённая аминокислотная последовательность соединения VK21A не обнаруживает аналогов с известными у бацилл пептидными антибиотиками. 4. Сидерофор, образуемый штаммом В. licheniformis VK21, представляет собой 2,3дигидроксибензоилглицилтреонин, сходный по структуре с известным сидерофором мезофильного штамма В. subtilis бациллибактином, но не идентичный ему. 26

29 Основные результаты диссертации изложены в следующих работах: 1. Темиров Ю.В., Есикова Т.З., Алахов Ю.Б. Скрининг термофильных штаммов рода Bacillus, продуцирующих вторичные метаболиты с антибактериальной активностью. Доклад на отчётной конференции ФИБХ, Пущино, 1999 г. 2. Темиров Ю.В., Есикова Т.З., Соколов С.Л., Евдокимова Е.Г., Алахов Ю.Б. Термофильные штаммы рода Bacillus продуценты вторичных метаболитов с антибактериальной активностью. Стендовый доклад на XIII зимней международной молодёжной научной школе, ИБХ РАН, Москва, 2001 г. 3. Темиров Ю.В, Есикова Т.З., Соколов С.Л., Евдокимова Е.Г., Алахов Ю.Б. Синтез вторичных метаболитов антимикробного действия термофильными штаммами рода Bacillus. Стендовый доклад на 5й Путинской конференции молодых учёных, 2001 г. 4. Темиров Ю.В., Есикова Т.З., Соколов С.Л., Захаров М.В., Кашпаров И.А., Винокуров Л.М., Алахов Ю.Б. Выделение и характеристика катехольного сидерофора, продуцируемого термофильным штаммом Bacillus licheniformis VK21. Доклад на отчётной конференции ФИБХ РАН, Пущино, 2001 г. 5. Темиров Ю.В., Есикова Т.З., Кашпаров И.А., Винокуров Л.М., Алахов Ю.Б. Вторичные метаболитыпептиды, продуцируемые термофильным штаммом Bacillus licheniformis VK21. Стендовый доклад на XIV зимней международной молодёжной научной школе, ИБХ РАН, Москва, 2002 г. 6. Есикова Т.З., Темиров Ю.В., Соколов С.Л., Алахов Ю.Б. Вторичные метаболиты антимикробного действия, продуцируемые термофильными штаммами Bacillus spp. VK2 и VK21 // Прикладная биохимия и микробиология Т С Темиров Ю.В., Есикова Т.З., Кашпаров И.А., Балашова Т.А., Винокуров Л.М., Алахов Ю.Б. Катехольный сидерофор, продуцируемый терморезистентным штаммом Bacillus licheniformis VK21 // Биоорганическая химия Т С Темиров Ю.В., Винокуров Л.М., Овчинникова Т.В., Кашпаров И.А., Алахов Ю.Б. Низкомолекулярные пептидные бактериоцины, образуемые термофильными штаммами Bacillus licheniformis. Доклад на отчётной конференции ФИБХ РАН, Пущино, 2004 г. 27

30

31

32 Подписано в печать 18 июня 2004 г. Заказ 410. Формат 60 х 90/16. Тираж 100 экз. Отпечатано в салоне оперативной печати АртПолиграф. Москва, Б. Якиманка, 13, оф Тел

Институт медицинской биотехнологии ФБУН ГНЦ ВБ Вектор, Бердск, Россия

Институт медицинской биотехнологии ФБУН ГНЦ ВБ Вектор, Бердск, Россия Мамедова Л.В. 1, Лебедев Л.Р. 2 1 Дипломница, ФГБОУ ВО Кубанский государственный университет, Краснодар; 2 д.м.н., зав. лабораторией нуклеиновых кислот и рекомбинантных белков, Институт медицинской биотехнологии

Подробнее

ВЛИЯНИЕ КОМПОНЕНТОВ ЭНЗИМАТИЧЕСКОЙ СРЕДЫ НА БИОСИНТЕЗ ТРИПТОФАНА

ВЛИЯНИЕ КОМПОНЕНТОВ ЭНЗИМАТИЧЕСКОЙ СРЕДЫ НА БИОСИНТЕЗ ТРИПТОФАНА УДК 579.222 ВЛИЯНИЕ КОМПОНЕНТОВ ЭНЗИМАТИЧЕСКОЙ СРЕДЫ НА БИОСИНТЕЗ ТРИПТОФАНА С. М. Шульга А. Ф. Ткаченко Е. А. Тигунова ГУ «Институт пищевой биотехнологии и геномики» Н. Е. Бейко НАН Украины, Киев А. И.

Подробнее

ПРОТЕИНАЗЫ BACILLUS INTERMEDIUS, СЕКРЕТИРУЕМЫЕ В ПОЗДНЕЙ СТАЦИОНАРНОЙ ФАЗЕ РОСТА

ПРОТЕИНАЗЫ BACILLUS INTERMEDIUS, СЕКРЕТИРУЕМЫЕ В ПОЗДНЕЙ СТАЦИОНАРНОЙ ФАЗЕ РОСТА УДК 577.156.576.851.5[6] ПРОТЕИНАЗЫ BACILLUS INTERMEDIUS, СЕКРЕТИРУЕМЫЕ В ПОЗДНЕЙ СТАЦИОНАРНОЙ ФАЗЕ РОСТА Н.П. Балабан, А.М. Марданова, М.Р. Шарипова, Л.А. Габдрахманова, Ю.С. Токмакова, Е.А. Соколова,

Подробнее

0,

0, УДК 665.5.06 ЭСТРОГЕНОПОДОБНЫЕ ВЕЩЕСТВА СО 2 -ЭКСТРАКТА ХМЕЛЯ Каленичина Е.В., Пелипенко Т.В., к.т.н., доцент Кубанский государственный технологический университет, г. Краснодар Аннотация: Известно, что

Подробнее

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Определение белка ОФС.1.2.3.0012.15 Взамен ст. ГФ XII, ч.1, ОФС 42-0053-07 Определение содержания белка проводят в лекарственных

Подробнее

«Высокопроизводительная система для поиска новых антибактериальных препаратов» кандидат химических наук, научный сотрудник

«Высокопроизводительная система для поиска новых антибактериальных препаратов» кандидат химических наук, научный сотрудник «Высокопроизводительная система для поиска новых антибактериальных препаратов» Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет

Подробнее

ВЛИЯНИЕ ЛЕКТИНА AZOSPIRILLUM BRASILENSE SP7 НА АКТИВНОСТЬ ПЕРОКСИДАЗЫ И КАТАЛАЗЫ В КОРНЯХ ПРОРОСТКОВ ПШЕНИЦЫ ПРИ ГИПО-, ГИПЕРТЕРМИИ И ЗАСОЛЕНИИ

ВЛИЯНИЕ ЛЕКТИНА AZOSPIRILLUM BRASILENSE SP7 НА АКТИВНОСТЬ ПЕРОКСИДАЗЫ И КАТАЛАЗЫ В КОРНЯХ ПРОРОСТКОВ ПШЕНИЦЫ ПРИ ГИПО-, ГИПЕРТЕРМИИ И ЗАСОЛЕНИИ Министерство образования и науки Российской Федерации ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ «САРАТОВСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

Подробнее

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Кальция глюконат ФС.2.1.0019.15 Кальция глюконат Взамен ФС 42-3019-94; Calcii gluconas взамен ГФ XII, ч.1, ФС 42-0238-07 D-Глюконат

Подробнее

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Натриевая соль N-никотиноил гамма-аминомасляной кислоты Натриевая соль N-никотиноил гамма-аминомасляной кислоты ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ ФС.2.1.0027.15 Natrii

Подробнее

Межлабораторная воспроизводимость Линейность

Межлабораторная воспроизводимость Линейность Валидация аналитических методов: практическое применение. Писарев В.В., к.х.н., МВА, заместитель генерального директора ФГУП «Государственный научный центр по антибиотикам», Москва (www.pisarev.ru) Введение

Подробнее

1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности (ВНИИКОП)

1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности (ВНИИКОП) ГОСТ Р 51435-99 Сок яблочный, сок яблочный концентрированный и напитки, содержащие яблочный сок. Метод определения содержания патулина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии. ОКС 67.160.20

Подробнее

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВ КОЛЛОИДНОГО СЕРЕБРА

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВ КОЛЛОИДНОГО СЕРЕБРА СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВ КОЛЛОИДНОГО СЕРЕБРА Р.Н. Костылева, В. А. Бурмистров, О.А. Полунина Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии Вектор, ЗАО НПЦ

Подробнее

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ ПЕРСПЕКТИВНЫХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ РОДОВ BACILLUS И PSEUDOMONAS ПРОДУЦЕНТОВ МИКРОБИОПРЕПАРАТОВ

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ ПЕРСПЕКТИВНЫХ ШТАММОВ БАКТЕРИЙ РОДОВ BACILLUS И PSEUDOMONAS ПРОДУЦЕНТОВ МИКРОБИОПРЕПАРАТОВ МАСЛИЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур. Вып. 2 (141), 29 А.М. Асатурова, кандидат биологических наук ГНУ ВНИИ масличных культур

Подробнее

диссертации, он посвящен современному состоянию исследований в области изучения биосинтеза лимонной кислоты различными микроорганизмами, в том числе

диссертации, он посвящен современному состоянию исследований в области изучения биосинтеза лимонной кислоты различными микроорганизмами, в том числе ОТЗЫВ официального оппонента на диссертационную работу Луниной Юлии Николаевны «Биосинтез лимонной кислоты мутантными штаммами дрожжей Yarrowia lipolytica из возобновляемого растительного сырья», представленную

Подробнее

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ПУЩИНСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ПУЩИНСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ПУЩИНСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР Пущинский научный центр был основан в 1956 году для развития фундаментальных исследований в области физико-химической биологии. (Постановление Совета Министров

Подробнее

СЕЛЕКЦИЯ ПРОДУЦЕНТОВ

СЕЛЕКЦИЯ ПРОДУЦЕНТОВ БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ Кафедра генетики СЕЛЕКЦИЯ ПРОДУЦЕНТОВ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЛАБОРАТОРНЫМ ЗАНЯТИЯМ Для студентов IVкурса специальности 1-31 01 01 «Биология»

Подробнее

отзыв на автореферат диссертации Плюта В.А.

отзыв на автореферат диссертации Плюта В.А. отзыв на автореферат диссертации Плюта В.А. на тему «Особенности образования биопленок и Quorum sensing регуляции при действии антибактериальных агентов», представленной на соискание ученой степени кандидата

Подробнее

МГУ им. Ломоносова, БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ Кафедра Физиологии Микроорганизмов

МГУ им. Ломоносова, БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ Кафедра Физиологии Микроорганизмов МГУ им. Ломоносова, БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ Кафедра Физиологии Микроорганизмов Тел. секретаря кафедры (95) 99--9, заведующего (95) 99--0 Действие исследуемых образцов материалов на рост и физиологические

Подробнее

Оглавление. Предисловие редакторов перевода...5 Предисловие редакторов шестого издания...7 Авторы...9 Принятые сокращения... 11

Оглавление. Предисловие редакторов перевода...5 Предисловие редакторов шестого издания...7 Авторы...9 Принятые сокращения... 11 Предисловие редакторов перевода...5 Предисловие редакторов шестого издания...7 Авторы...9 Принятые сокращения... 11 Глава 1. Теоретические основы биохимического анализа...13 (разд. 1.7 в соавторстве с

Подробнее

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Аминокапроновая кислота ФС.2.1.0001.15 Аминокапроновая кислота Acidum aminocaproicum Взамен ВФС 42-2720-96 6-Аминогексановая кислота

Подробнее

КЛЕТОЧНЫЕ ЯДРА И ПЛАСТИДЫ РАСТЕНИЙ: биохимия и биотехнология

КЛЕТОЧНЫЕ ЯДРА И ПЛАСТИДЫ РАСТЕНИЙ: биохимия и биотехнология НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ НАУК БЕЛАРУСИ ЦЕНТРАЛЬНЫЙ БОТАНИЧЕСКИЙ САД ОТДЕЛ БИОХИМИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ РАСТЕНИЙ КЛЕТОЧНЫЕ ЯДРА И ПЛАСТИДЫ РАСТЕНИЙ: биохимия и биотехнология Сборник материалов Международной конференции,

Подробнее

Бюллетень медицинских Интернет конференций (ISSN ) Том 2. 6

Бюллетень медицинских Интернет конференций (ISSN ) Том 2. 6 375 ID: 2012 06 1003 A 1587 Оригинальная статья Пронина Е.А., Шуб Г.М. Влияние электромагнитного излучения на бактериальные клетки ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздравсоцразвития России,

Подробнее

характерных для различных групп гидролаз. Обнаружение консервативных доменов необходимо для предсказания возможной активности гилролаз, поскольку

характерных для различных групп гидролаз. Обнаружение консервативных доменов необходимо для предсказания возможной активности гилролаз, поскольку Аннотация проекта (ПНИЭР), выполняемого в рамках ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 2020 годы» Номер Соглашения о предоставлении

Подробнее

ИССЛЕДОВАНИЕ МОРФОЛОГИИ ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОК AZOTOBACTER CHROOCOCCUM В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ МЕТОДОМ АТОМНО-СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИ

ИССЛЕДОВАНИЕ МОРФОЛОГИИ ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОК AZOTOBACTER CHROOCOCCUM В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ МЕТОДОМ АТОМНО-СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИ ПОВЕРХНОСТЬ. РЕНТГЕНОВСКИЕ, СИНХРОТРОННЫЕ И НЕЙТРОННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ. 2005, N5, с 87-92 УДК 576.3.314: 579.23.234 ИССЛЕДОВАНИЕ МОРФОЛОГИИ ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОК AZOTOBACTER CHROOCOCCUM В УСЛОВИЯХ ГИПЕРТЕРМИИ

Подробнее

Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук (ИБФРМ РАН)

Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук (ИБФРМ РАН) ф едеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук (ИБФРМ РАН) 410049, г.саратов, просп. Энтузиастов, д. 13. Тел.:

Подробнее

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ Проект Инструкции на метод 295 (утверждён на заседании Ученого совета Государственного учреждения «Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии» 12 от 02.12.2013 МИНИСТЕРСТВО

Подробнее

Лабораторная работа 2. Приготовление растворов и изучение их свойств. Цель работы: исследовать процесс растворения веществ; овладеть методиками

Лабораторная работа 2. Приготовление растворов и изучение их свойств. Цель работы: исследовать процесс растворения веществ; овладеть методиками Лабораторная работа 2. Приготовление растворов и изучение их свойств. Цель работы: исследовать процесс растворения веществ; овладеть методиками приготовления растворов заданной концентрации, изучение их

Подробнее

ХАРАКТЕРИСТИКА МЕМБРАННОГО КОМПЛЕКСА ЖИВЫХ ТКАНЕЙ ЛИСТВЕННИЦЫ СИБИРСКОЙ

ХАРАКТЕРИСТИКА МЕМБРАННОГО КОМПЛЕКСА ЖИВЫХ ТКАНЕЙ ЛИСТВЕННИЦЫ СИБИРСКОЙ е Химия растительного сырья. 2000. 4. С. 49 53. УДК 630*181.324 ХАРАКТЕРИСТИКА МЕМБРАННОГО КОМПЛЕКСА ЖИВЫХ ТКАНЕЙ ЛИСТВЕННИЦЫ СИБИРСКОЙ П.В. Миронов, Е.В. Алаудинова, Ю.С. Шимова, С.М. Репях Сибирский

Подробнее

Химическая технология шифр направления подготовки Технология неорганических веществ шифр научной специальности

Химическая технология шифр направления подготовки Технология неорганических веществ шифр научной специальности ПРОГРАММА вступительного испытания по специальной дисциплине, соответствующей направленности программы аспирантуры 18.06.01 Химическая технология шифр направления подготовки наименование направления подготовки,

Подробнее

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Методы количественного определения витаминов ОФС.1.2.3.0017.15 Взамен ст. ГФ XI, вып.2 В данной статье изложены общие принципы

Подробнее

Препарат разрешен к применению в качестве средства безрецептурного отпуска. Несмотря на малую токсичность

Препарат разрешен к применению в качестве средства безрецептурного отпуска. Несмотря на малую токсичность ИЗУЧЕНИЕ УСЛОВИЙ ИЗОЛИРОВАНИЯ АФОБАЗОЛА ИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ В.А. Кнауб, Н.Н. Кнауб, Е.С. Козлова, В.Б. Русинович г. Барнаул Афобазол производное 2-меркаптобензимидазола, селективный анксиолитик,

Подробнее

ОТЗЫВ ОФИЦИАЛЬНОГО ОППОНЕНТА

ОТЗЫВ ОФИЦИАЛЬНОГО ОППОНЕНТА ОТЗЫВ ОФИЦИАЛЬНОГО ОППОНЕНТА о диссертации Шашкова Михаила Вадимовича «Исследование высокополярных неподвижных жидких фаз на основе ионных жидкостей для капиллярной газовой хроматографии» на соискание

Подробнее

2 будто монографию, причем единую тему этой «монографии» даже сложно сформулировать, поэтому общий заголовок литобзора отсутствует. Это ВСЕ, что мы мо

2 будто монографию, причем единую тему этой «монографии» даже сложно сформулировать, поэтому общий заголовок литобзора отсутствует. Это ВСЕ, что мы мо ОТЗЫВ официального оппонента на диссертационную работу ЛЕГОЦКОГО Сергея Александровича "Получение, изучение свойств, стабилизация рекомбинантного эндолизина бактериофага S394 и разработка способа эффективного

Подробнее

ОТЧЕТ О БОЛЬНИЧНЫХ ИСПЫТАНИЯХ

ОТЧЕТ О БОЛЬНИЧНЫХ ИСПЫТАНИЯХ Научно-исследовательский проект 04 октября 2006 г. ОТЧЕТ О БОЛЬНИЧНЫХ ИСПЫТАНИЯХ Компания «Lab MET», г. Компания «Авеком», г. Ломмел консультация и анализ данных Цель исследования. Представленные в данном

Подробнее

АНАЛИЗ СПЕКТРА ПОГЛОЩЕНИЯ ОКРАШЕННОГО ВЕЩЕСТВА Левин С.С. Кубанский Государственный Технологический Университет Краснодар, Россия

АНАЛИЗ СПЕКТРА ПОГЛОЩЕНИЯ ОКРАШЕННОГО ВЕЩЕСТВА Левин С.С. Кубанский Государственный Технологический Университет Краснодар, Россия АНАЛИЗ СПЕКТРА ПОГЛОЩЕНИЯ ОКРАШЕННОГО ВЕЩЕСТВА Левин С.С. Кубанский Государственный Технологический Университет Краснодар, Россия Свойство молекул и атомов поглощать свет определенной длины волны, характерных

Подробнее

ОТЗЫВ НАУЧНОГО РУКОВОДИТЕЛЯ

ОТЗЫВ НАУЧНОГО РУКОВОДИТЕЛЯ ОТЗЫВ НАУЧНОГО РУКОВОДИТЕЛЯ о работе Плюта Владимира Александровича по кандидатской диссертации «Особенности образования биопленок и Quorum Sensing регуляция при действии антибактериальных агентов», представленной

Подробнее

2. Световой микроскоп с иммерсионным объективом 100/1,25; окуляром

2. Световой микроскоп с иммерсионным объективом 100/1,25; окуляром Настоящая инструкция по применению (далее инструкция) разработана с целью диагностики нарушений и отклонений в системе врожденного иммунитета у беременных с угрожающими преждевременными родами и воспалительными

Подробнее

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Вода очищенная ФС.2.2.0020.15 Вода очищенная Взамен ГФ Х, ст. 73; Aqua purificata взамен ФС 42-2619-97 Н 2 О М. м. 18,02 Настоящая

Подробнее

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Первый заместитель Министра Р.А. Часнойть 30 мая 2007 г Регистрационный

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Первый заместитель Министра Р.А. Часнойть 30 мая 2007 г Регистрационный МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Первый заместитель Министра Р.А. Часнойть 30 мая 2007 г Регистрационный 050-0606 ИСПЫТАНИЕ НА ПОДЛИННОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, ОБЛАДАЮЩИХ АНТИАРИТМИЧЕСКОЙ

Подробнее

СТАНДАРТ ОСНОВНОГО ОБЩЕГО ОБРАЗОВАНИЯ ПО ХИМИИ

СТАНДАРТ ОСНОВНОГО ОБЩЕГО ОБРАЗОВАНИЯ ПО ХИМИИ СТАНДАРТ ОСНОВНОГО ОБЩЕГО ОБРАЗОВАНИЯ ПО ХИМИИ Изучение химии на ступени основного общего образования направлено на достижение следующих целей: освоение важнейших знаний об основных понятиях и законах

Подробнее

Фамилия Шифр Имя Район/город Рабочее место Шифр Итого:

Фамилия Шифр Имя Район/город Рабочее место Шифр Итого: Фамилия Шифр Имя Район/город Рабочее место Шифр Итого: ЗАДАНИЯ практического тура регионального этапа XXVIII Всероссийской олимпиады школьников по биологии. 2011-12 уч. год. 11 класс БИОХИМИЯ. Оборудование,

Подробнее

Спектрофотометрическое определение ионов алюминия (III) и железа (III) в растворе с применением метода наименьших квадратов

Спектрофотометрическое определение ионов алюминия (III) и железа (III) в растворе с применением метода наименьших квадратов Лабораторная работа к практикуму «Спектрофотометрические методы анализа» Спектрофотометрическое определение ионов алюминия (III) и железа (III) в растворе с применением метода наименьших квадратов Разработчики:

Подробнее

3. Объем дисциплины и виды учебной работы:

3. Объем дисциплины и виды учебной работы: 1. Цели и задачи дисциплины: Цель дисциплины сформировать у студентов знания об использовании в промышленности физико-химических принципов работы живой клетки, ознакомить с методами и технологиями производства

Подробнее

МИНЕРАЛИЗАЦИЯ И ТРАНСФОРМАЦИЯ ОРГАНИЧЕСКОГО ВЕЩЕСТВА ВЕРХОВОГО ТОРФА ПРИ ВНЕСЕНИИ МОЧЕВИНЫ И БИОКАТАЛИЗАТОРА (СООБЩЕНИЕ 2)

МИНЕРАЛИЗАЦИЯ И ТРАНСФОРМАЦИЯ ОРГАНИЧЕСКОГО ВЕЩЕСТВА ВЕРХОВОГО ТОРФА ПРИ ВНЕСЕНИИ МОЧЕВИНЫ И БИОКАТАЛИЗАТОРА (СООБЩЕНИЕ 2) ХИМИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. 28. 4. С. 153 159. УДК 622.331:636.86.7 МИНЕРАЛИЗАЦИЯ И ТРАНСФОРМАЦИЯ ОРГАНИЧЕСКОГО ВЕЩЕСТВА ВЕРХОВОГО ТОРФА ПРИ ВНЕСЕНИИ МОЧЕВИНЫ И БИОКАТАЛИЗАТОРА (СООБЩЕНИЕ 2) Л.В. Касимова

Подробнее

ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫЙ СТАНДАРТ ОСНОВНОГО ОБЩЕГО ОБРАЗОВАНИЯ ПО ХИМИИ

ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫЙ СТАНДАРТ ОСНОВНОГО ОБЩЕГО ОБРАЗОВАНИЯ ПО ХИМИИ ОБРАЗОВАТЕЛЬНЫЙ СТАНДАРТ ОСНОВНОГО ОБЩЕГО ОБРАЗОВАНИЯ ПО ХИМИИ Изучение химии в основной школе направлено на достижение следующих целей: освоение важнейших знаний о химической символике, химических понятиях,

Подробнее

Фотометрический метод определения нитратов и нитритов в биологических жидкостях (инструкция по применению)

Фотометрический метод определения нитратов и нитритов в биологических жидкостях (инструкция по применению) МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Первый заместитель министра здравоохранения 19 марта 2001 г. Регистрационный No 91-0008 В.И. Ореховский Фотометрический метод определения нитратов

Подробнее

Структурные изменения клеточных стенок и рост УФ-чувствительных штаммов Salmonella derby в зависимости от кислотности среды

Структурные изменения клеточных стенок и рост УФ-чувствительных штаммов Salmonella derby в зависимости от кислотности среды БИОХИМИЯ УДК 577.12 А.З. Пепоян Структурные изменения клеточных стенок и рост УФ-чувствительных штаммов Salmonella derby в зависимости от кислотности среды (Представлено академиком К.Г. Карагезяном 30/IV

Подробнее

Государственное профессиональное образовательное учреждение «Новокузнецкий техникум пищевой промышленности»

Государственное профессиональное образовательное учреждение «Новокузнецкий техникум пищевой промышленности» Государственное профессиональное образовательное учреждение «Новокузнецкий техникум пищевой промышленности» МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХИМИИ и задания для выполнения контрольных работ для студентов, обучающихся

Подробнее

отзыв содержащий 211 ссылок. В тексте работы имеется 30 рисунков и 3 таблицы. Ф.7

отзыв содержащий 211 ссылок. В тексте работы имеется 30 рисунков и 3 таблицы. Ф.7 отзыв ведущей организации - Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института молекулярной генетики Российской академии наук, - на диссертацию Прошкина Сергея Александровича "Механизмы

Подробнее

Обработка растворов альбумина и иммуноглобулина с помощью ультрафильтрационной системы «ПЕЛЛИКОН»

Обработка растворов альбумина и иммуноглобулина с помощью ультрафильтрационной системы «ПЕЛЛИКОН» MILLIPORE Обработка растворов альбумина и иммуноглобулина с помощью ультрафильтрационной системы «ПЕЛЛИКОН» ВВЕДЕНИЕ На протяжении многих лет ультрафильтрация использовалась, как эффективный метод разделения

Подробнее

Стандартизация технологий для клинических микробиологических исследований. В.В. Меньшиков

Стандартизация технологий для клинических микробиологических исследований. В.В. Меньшиков Стандартизация технологий для клинических микробиологических исследований В.В. Меньшиков Факторы вариации результатов клинических исследований Биологическая вариация Патологическая вариация Ятрогенная

Подробнее

Набор для выявления вируса болезни Ньюкасла

Набор для выявления вируса болезни Ньюкасла Набор для выявления вируса болезни Ньюкасла (количественный) Вир-8-100, на 100 реакций 1 Содержание Компоненты набора... 3 Область применения... 3 Гарантия... 3 Описание... 4 Меры предосторожности... 4

Подробнее

Кузнецов Андрей Сергеевич Влияние сиаловых кислот на структуру и активность линейных катионных пептидов латарцинов и мелиттина

Кузнецов Андрей Сергеевич Влияние сиаловых кислот на структуру и активность линейных катионных пептидов латарцинов и мелиттина Московский физико-технический институт (государственный университет) Факультет молекулярной и биологической физики Кафедра физико-химической биологии и биотехнологии Институт биоорганической химии имени

Подробнее

Химия 1. Первоначальные химические понятия. Предмет химии. Тела и вещества. Основные методы познания: наблюдение, измерение, описание, эксперимент.

Химия 1. Первоначальные химические понятия. Предмет химии. Тела и вещества. Основные методы познания: наблюдение, измерение, описание, эксперимент. Химия 1. Первоначальные химические понятия. Предмет химии. Тела и вещества. Основные методы познания: наблюдение, измерение, описание, эксперимент. Физические и химические явления. Правила безопасности

Подробнее

ДИДАКТИКА: ОТВЕТ НА ВЫЗОВЫ ПЕДАГОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКИ

ДИДАКТИКА: ОТВЕТ НА ВЫЗОВЫ ПЕДАГОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКИ ДИДАКТИКА: ОТВЕТ НА ВЫЗОВЫ ПЕДАГОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКИ ФОРМИРОВАНИЕ ОБЩЕГО ПРИЕМА ПОЗНАВАТЕЛЬНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ У СТУДЕНТОВ-БИОЛОГОВ (НА ПРИМЕРЕ ВЫДЕЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ В ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЕ) В

Подробнее

Экзаменационный билет 2. Проф. Левашов Андрей Вадимович Проф. Копылов Алексей Михайлович К.х.н. Федорчук Владимир Витальевич

Экзаменационный билет 2. Проф. Левашов Андрей Вадимович Проф. Копылов Алексей Михайлович К.х.н. Федорчук Владимир Витальевич Экзаменационный билет 1. 1. Функции, структура и свойства биологических мембран. 2. Стационарная кинетика ферментативных реакций. Схема Михаэлиса-Ментен. Методы определения параметров из экспериментальных

Подробнее

Тесты по курсу Биофизика

Тесты по курсу Биофизика Тесты по курсу Биофизика Задача 1. Первоначальная концентрация в крови некоторого препарата равнялась с 0 = 50 мкг/мл, а через t = 10 ч уменьшилась до с = 20 мкг/мл. Рассчитайте константу

Подробнее

ОТЗЫВ ВЕДУЩЕЙ ОРГАНИЗАЦИИ

ОТЗЫВ ВЕДУЩЕЙ ОРГАНИЗАЦИИ ОТЗЫВ ВЕДУЩЕЙ ОРГАНИЗАЦИИ Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института биологии Карельского научного центра Российской академии наук (ИБ КарНЦ РАН) на диссертационную работу Алисултановой

Подробнее

Терапевтический лекарственный мониторинг при высокодозной терапии метотрексатом остеосаркомы у детей

Терапевтический лекарственный мониторинг при высокодозной терапии метотрексатом остеосаркомы у детей ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН Экспресс-лаборатория ЦКЛО НИИ КО Терапевтический лекарственный мониторинг при высокодозной терапии метотрексатом остеосаркомы у детей Стрижевская Александра Михайловна

Подробнее

Таблица 2. Начальная скорость и глубина ферментативного гидролиза в зависимости от вида целлюлозосодержащего сырья и способа предобработки

Таблица 2. Начальная скорость и глубина ферментативного гидролиза в зависимости от вида целлюлозосодержащего сырья и способа предобработки Изобретение относится к микробиологической, а также пищевой промышленности и может быть использовано при утилизации отходов, содержащих целлюлозу, для получения глюкозы и других сахаров, глюкозо-фруктозных

Подробнее

ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРИРОДНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ В КАЧЕСТВЕ КИСЛОТНО-ОСНОВНЫХ ИНДИКАТОРОВ

ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРИРОДНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ В КАЧЕСТВЕ КИСЛОТНО-ОСНОВНЫХ ИНДИКАТОРОВ ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ Навалихина Ольга Викторовна учитель химии КОГОАУ «Лицей естественных наук» г. Киров, Кировская область ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРИРОДНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ В КАЧЕСТВЕ КИСЛОТНО-ОСНОВНЫХ

Подробнее

«АНТИБИОТИКИ АЛИЦИКЛИЧЕСКОГО И АРОМАТИЧЕСКОГО РЯДА»

«АНТИБИОТИКИ АЛИЦИКЛИЧЕСКОГО И АРОМАТИЧЕСКОГО РЯДА» ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ СТУДЕНТОВ 5 КУРСА ФАКУЛЬТЕТА ПО ПОДГОТОВКЕ ИНОСТРАННЫХ ГРАЖДАН Фм 11(5,0)д К ЗАНЯТИЮ ПО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ХИМИИ на тему: «АНТИБИОТИКИ АЛИЦИКЛИЧЕСКОГО И АРОМАТИЧЕСКОГО

Подробнее

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ОКСИМА ДИКАМБЫ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ОКСИМА ДИКАМБЫ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ Утверждены Министерством здравоохранения СССР 29 июля 1991 г. N 6117-91 МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ОКСИМА ДИКАМБЫ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ Cl / Мол.

Подробнее

1. Основные структурные единицы микробной клетки, их характеристика. 2. Что представляет собой процесс дыхания у микроорганизмов и чем он

1. Основные структурные единицы микробной клетки, их характеристика. 2. Что представляет собой процесс дыхания у микроорганизмов и чем он 0 1. Предмет и задачи микробиологии. Деление микробиологии на самостоятельные науки: название, общая характеристика. 2. На какие группы делят микроорганизмы по типам питания. 3. Как и на каких питательных

Подробнее

1. Ковалентные связи в белках и ферментах. Приведите примеры.

1. Ковалентные связи в белках и ферментах. Приведите примеры. 1. Ковалентные связи в белках и ферментах. Приведите примеры. БИЛЕТ 1 2. На чем основано разделение белков фракционированием в присутствии разных концентраций солей. От каких примесей этот метод позволяет

Подробнее

Краткая характеристика создаваемой/созданной научной (научнотехнической,

Краткая характеристика создаваемой/созданной научной (научнотехнической, Аннотация проекта (ПНИЭР), выполняемого в рамках ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 2020 годы» Номер Соглашения о предоставлении

Подробнее

физиологического раствора. Тупферы инкубировали при комнатной температуре (далее КТ) чего жидкость перемешивали в течение 1 минуты.

физиологического раствора. Тупферы инкубировали при комнатной температуре (далее КТ) чего жидкость перемешивали в течение 1 минуты. Сравнение функциональных возможностей транспортных систем Sigma-Swab компании Medical Wire и HealthLink со средой Эймса компании Copan при сохранении микроорганизмов в жизнеспособном состоянии. М.Стакзен

Подробнее

2. Измерение массовой концентрации общего железа с сульфосалициловой кислотой

2. Измерение массовой концентрации общего железа с сульфосалициловой кислотой Государственный стандарт Союза ССР ГОСТ 4011-72 "Вода питьевая. Методы измерения массовой концентрации общего железа" (введен в действие постановлением Госстандарта СССР от 9 октября 1972 г. N 1855) Drinking

Подробнее

Зеленодольский институт машиностроения и информационных технологий (филиал) КНИТУ КАИ. Отделение среднего профессионального образования

Зеленодольский институт машиностроения и информационных технологий (филиал) КНИТУ КАИ. Отделение среднего профессионального образования Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Казанский национальный исследовательский технический университет им. А.Н. Туполева КАИ» (КНИТУ КАИ) Зеленодольский

Подробнее

Методические рекомендации. Автор. Аннотация. Низкомолекулярные лекарственные средства

Методические рекомендации. Автор. Аннотация. Низкомолекулярные лекарственные средства Тестирование комбинированных лекарственных препаратов с фиксированной дозировкой на содержание примесей с помощью решения для анализа примесей системы Agilent 129 Infinity II HDR-DAD Impurity Analyzer

Подробнее

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Калия хлорид ФС.2.2.0009.15 Калия хлорид Kalii chloridum Взамен ГФ X, ст. 362 Хлорид калия KCl М. м. 74,55 Содержит не менее 99,0

Подробнее

Номенклатура Изомерия Свойства Получение Белки

Номенклатура Изомерия Свойства Получение Белки Номенклатура Изомерия Свойства Получение Белки Аминокислоты органические бифункциональные соединения, в состав которых входят карбоксильные группы СООН и аминогруппы -NH 2. Общая формула предельных аминокислот

Подробнее

ВЛИЯНИЕ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ НА БИОСИНТЕЗ АМИНОКИСЛОТ КОРИНЕФОРМНЫМИ БАКТЕРИЯМИ

ВЛИЯНИЕ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ НА БИОСИНТЕЗ АМИНОКИСЛОТ КОРИНЕФОРМНЫМИ БАКТЕРИЯМИ ºðºì²ÜÆ äºî²î²ü вزÈê²ð²ÜÆ Æî²Î²Ü îºôºî² Æð Ó ÅÍÛÅ ÇÀÏÈÑÊÈ ÅÐÅÂÀÍÑÊÎÃÎ ÃÎÑÓÄÀÐÑÒÂÅÍÍÎÃÎ ÓÍÈÂÅÐÑÈÒÅÒÀ øçùç³ Ï»Ýë³µ³ÝáõÃÛáõÝ 3, 2009 Õèìèÿ è áèîëîãèÿ Б и оло ги я УДК 577.112.3 Ф. Н. ТХРУНИ, А. О. КОЛОЯН,

Подробнее

ОТЧЕТ об испытаниях энергетической активности питьевых минеральных природных вод «Dana» и «Svetla».

ОТЧЕТ об испытаниях энергетической активности питьевых минеральных природных вод «Dana» и «Svetla». ОТЧЕТ об испытаниях энергетической активности питьевых минеральных природных вод «Dana» и «Svetla». Резюме. С использованием разработанного на каф. биоорганической химии Биологического факультета МГУ хемилюминесцентного

Подробнее

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Спирт этиловый 95%, 96 % ФС.2.1.0036.15 Этанол Взамен ВФС 42-2761-96; Ethanolum взамен ФС 42-3072-00 Этанол H 3 C OH С 2 Н 6 О М.

Подробнее

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АКТИВНОСТИ ЛИПАЗ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АКТИВНОСТИ ЛИПАЗ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АКТИВНОСТИ ЛИПАЗ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ Бельских А.А. Тобольский Педагогический Институт им. Д.И.Менделеева (Филиал) ТюмГУ в г. Тобольске Тобольск, Россия COMPARATIVE CHARACTERISTIC

Подробнее

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ МОЮЩИХ СРЕДСТВ "ЛОТОС", "ЭРА", "ОКА" В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ МОЮЩИХ СРЕДСТВ ЛОТОС, ЭРА, ОКА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ. Утверждаю Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР А.И.ЗАИЧЕНКО 12 декабря 1988 г. N 4872-88 МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ МОЮЩИХ СРЕДСТВ "ЛОТОС",

Подробнее

Возможности использования жидких транспортных систем для взятия биологического материала

Возможности использования жидких транспортных систем для взятия биологического материала Возможности использования жидких транспортных систем для взятия биологического материала Казеннова Дарья специалист по микробиологической продукции ЗАО «Фирма ГАЛЕН» г. Москва Первая система для взятия

Подробнее

Задворнова Т. А., аспирант, Колодязная В. С., д.т.н., профессор

Задворнова Т. А., аспирант, Колодязная В. С., д.т.н., профессор УДК 664.8.037.1 Влияние обработки яблок биопрепаратами на физиолого-биохимические изменения при холодильном хранении плодов Задворнова Т. А., аспирант, Колодязная В. С., д.т.н., профессор valdurtera@rambler.ru>

Подробнее

I. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД» 4 Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА» 5

I. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД» 4 Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА» 5 содержание I. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД» 4 Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА» 5 II. СОРБЕНТНЫЙ МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК Комплект

Подробнее

ОФС ВзаменГФХ. Взамен ст. ГФ XI, вып.1. Взамен ГФ XII, ч.1, ОФС Инфракрасные спектры (колебательные спектры) (ИК-спектры)

ОФС ВзаменГФХ. Взамен ст. ГФ XI, вып.1. Взамен ГФ XII, ч.1, ОФС Инфракрасные спектры (колебательные спектры) (ИК-спектры) Спектрометрия в инфракрасной области ОФС.1.2.1.1.0002.15 ВзаменГФХ Взамен ст. ГФ XI, вып.1 Взамен ГФ XII, ч.1, ОФС 42-0043-07 Инфракрасные спектры (колебательные спектры) (ИК-спектры) возникают вследствие

Подробнее

Пекин июль Практический тест. Часть IV

Пекин июль Практический тест. Часть IV СТРАНА: УЧАСТНИК: 16-я Международная Биологическая Олимпиада Пекин июль 2005 Практический тест Часть IV Общее предоставляемое время: 90 минут Загружено с сайта http://bioturnir.ru 43 16-я МБО - Практический

Подробнее

ПРИМЕНЕНИЕ МЕМБРАННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ В БИОЛОГИЧЕСКОЙ ОЧИСТКЕ СТОЧНЫХ ВОД

ПРИМЕНЕНИЕ МЕМБРАННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ В БИОЛОГИЧЕСКОЙ ОЧИСТКЕ СТОЧНЫХ ВОД УДК 21474 ПРИМЕНЕНИЕ МЕМБРАННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ В БИОЛОГИЧЕСКОЙ ОЧИСТКЕ СТОЧНЫХ ВОД Вязьмикина К.И., студент Россия, 105005, г. Москва, МГТУ им. Н.Э. Баумана, кафедра «Экология и промышленная безопасность»

Подробнее

ИЗУЧЕНИЕ И СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЛИПОФИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ ЗЕЛЕНЫХ, КРАСНЫХ И ЧЕРНЫХ ЛИСТЬЕВ БАДАНА ТОЛСТОЛИСТНОГО, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО НА АЛТАЕ

ИЗУЧЕНИЕ И СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЛИПОФИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ ЗЕЛЕНЫХ, КРАСНЫХ И ЧЕРНЫХ ЛИСТЬЕВ БАДАНА ТОЛСТОЛИСТНОГО, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО НА АЛТАЕ Химия растительного сырья. 1999. 2. С. 113 117 УДК 615.322 ИЗУЧЕНИЕ И СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЛИПОФИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ ЗЕЛЕНЫХ, КРАСНЫХ И ЧЕРНЫХ ЛИСТЬЕВ БАДАНА ТОЛСТОЛИСТНОГО, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО НА АЛТАЕ Л.М. Федосеева,

Подробнее

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Этиловый эфир альфа-бромизовалериановой кислоты Этилбромизовалерианат Ethylis bromoisovaleras ФС.2.1.0047.15 Взамен ФС 42-3096-00

Подробнее

Иммобилизованные растительные клетки. Лекция 7

Иммобилизованные растительные клетки. Лекция 7 Иммобилизованные растительные клетки Лекция 7 План лекции: 1. Применение культур растительных клеток для получения БАВ, их преимущества и недостатки. 2. Преимущества иммобилизованных растительных клеток.

Подробнее

Адаптатции к наборам Парма диагностика

Адаптатции к наборам Парма диагностика АЛЬБУМИН (albumin) Код 10702-2х100 мл 1. ОБЩИЕ УКАЗАНИЯ: Альбумин реагирует с бромкрезоловым зелёным в кислой среде и образует комплекс сине-зелёного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна

Подробнее

отзыв Актуальность работы

отзыв Актуальность работы отзыв 1 официального оппонента на диссертационную работу ЯРОШЕНКО Ирины Сергеевны по теме: «НОВЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ АНАЛИЗА БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕД С ПОМОЩЬЮ МУЛЬТИСЕНСОРНЫХ СИСТЕМ», представленной на соискание ученой

Подробнее

МИНОБРНАУКИ РОССИИ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТИОМОЧЕВИНЫ И БЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ

МИНОБРНАУКИ РОССИИ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТИОМОЧЕВИНЫ И БЕНЗОЙНОЙ КИСЛОТЫ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ МИНОБРНАУКИ РОССИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Юго-Западный государственный университет» (ЮЗГУ) Кафедра органической и аналитической

Подробнее

Оборудование и материалы. 2. Ротационный испаритель с ловушкой по ТУ (завод "Химлабприбор").

Оборудование и материалы. 2. Ротационный испаритель с ловушкой по ТУ (завод Химлабприбор). Утверждены Минздравом СССР 29 декабря 1984 г. N 3184-84 МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОБНАРУЖЕНИЮ, ИДЕНТИФИКАЦИИ И ОПРЕДЕЛЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ Т-2 ТОКСИНА В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ПРОДОВОЛЬСТВЕННОМ СЫРЬЕ МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Подробнее

ПРОГРАММА «Биотехнология» Лектор проф. С.Н. Загребельный. (32 час.) I. Организационно-методический раздел. 1.1.Название курса. Биотехнология.

ПРОГРАММА «Биотехнология» Лектор проф. С.Н. Загребельный. (32 час.) I. Организационно-методический раздел. 1.1.Название курса. Биотехнология. ПРОГРАММА «Биотехнология» Лектор проф. С.Н. Загребельный. (32 час.) I. Организационно-методический раздел. 1.1.Название курса. Биотехнология. Курс реализуется в рамках направления «химия», относится к

Подробнее

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ 6 по дисциплине ФИЗИЧЕСКИЕ И ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЯДЕРНЫХ МАТЕРИАЛОВ

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ 6 по дисциплине ФИЗИЧЕСКИЕ И ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЯДЕРНЫХ МАТЕРИАЛОВ ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ 6 по дисциплине ФИЗИЧЕСКИЕ И ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЯДЕРНЫХ МАТЕРИАЛОВ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ Фотоколориметрический анализ (молекулярная абсорбционная спектроскопия) относится к оптическим

Подробнее

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Испытания на чистоту и ОФС.1.2.2.2.0011.15 допустимые пределы примесей. Взамен ГФ XII, ч. 1, Железо ОФС 42-0058-07 Испытания

Подробнее

Инструкция по выполнению методик по научному направлению «Биохимические исследования»

Инструкция по выполнению методик по научному направлению «Биохимические исследования» Инструкция по выполнению методик по научному направлению «Биохимические исследования» Разработала научный консультант НИЦ, к.х.н. Е.Л.Алексахина, ответственная за выполнение данного блока методик 1 Метод

Подробнее

С. В. Ельчиц, В. А. Домарецкий, Б. И. Хиврич, В. А. Чугуй, Л. А. Мельниченко. Киевский технологический институт пищевой промышленности (КТИПП)

С. В. Ельчиц, В. А. Домарецкий, Б. И. Хиврич, В. А. Чугуй, Л. А. Мельниченко. Киевский технологический институт пищевой промышленности (КТИПП) С. В. Ельчиц, В. А. Домарецкий, Б. И. Хиврич, В. А. Чугуй, Л. А. Мельниченко. Киевский технологический институт пищевой промышленности (КТИПП) Глюкозо-фруктозные сиропы (ГФС), получаемые из крахмала, являются

Подробнее

Перечень элементов содержания, проверяемых на вступительном экзамене по ХИМИИ

Перечень элементов содержания, проверяемых на вступительном экзамене по ХИМИИ Перечень элементов содержания, проверяемых на вступительном экзамене по ХИМИИ Предметное тестирование позволяет оценить уровень общеобразовательной подготовки по химии выпускников IX классов общеобразовательных

Подробнее

руководитель: А. А. Мазуренко, учитель химии и биологии

руководитель: А. А. Мазуренко, учитель химии и биологии САЛИЦИЛОВАЯ КИСЛОТА КАК ЭНДОГЕННЫЙ РЕГУЛЯТОР РОСТА И ИНДУКТОР УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ Щавелева Вероника, 9 класс; государственное учреждение образования «Средняя школа 9 г. Бобруйска» Щавелева Вероника Александровна

Подробнее

Мы продолжаем публиковать материалы о современных методах препаративной

Мы продолжаем публиковать материалы о современных методах препаративной СОВРЕМЕННАЯ ПРЕПАРАТИВНАЯ ФЛЕШ-ХРОМАТОГРАФИЯ Часть 2* А.Аболин, к.х.н., "ГалаХим" abolin@galachem.ru П.-Ф. Икар, Interchim (Франция) Мы продолжаем публиковать материалы о современных методах препаративной

Подробнее

ЛЕКЦИЯ 11 ОЦЕНКА АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ

ЛЕКЦИЯ 11 ОЦЕНКА АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ ЛЕКЦИЯ 11 ОЦЕНКА АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ Все антимикробные (противомикробные) лекарственные средства можно разделить на 2 основные группы: - Химиопрепараты;

Подробнее

25th INTERNATIONAL BIOLOGY OLYMPIAD

25th INTERNATIONAL BIOLOGY OLYMPIAD 25th INTERNATIONAL BIOLOGY OLYMPIAD 5 th 13 rd July, 2014 INDONESIA ПРАКТИЧЕСКИЙ ТЕСТ 2 АНАТОМИЯ И ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ Количество баллов: 96 Длительность: 90 минут СТРАНА:... СТУДЕНТ:... Дорогие Участники,

Подробнее