Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Save this PDF as:
 WORD  PNG  TXT  JPG

Размер: px
Начинать показ со страницы:

Download "Полимеразная цепная реакция (ПЦР)."

Транскрипт

1 Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Гребенникова Т. В. Внедрение метода ПЦР в лабораторную практику стало одним из наиболее важных событий в биологии и медицине. Метод ПЦР позволяет определять малые и сверхмалые количества нуклеиновых кислот, а, следовательно, поднимает лабораторную диагностику на принципиально новый уровень уровень прямого обнаружения инфекционного агента как вирусной, так и бактериальной природы. Методом ПЦР можно определить любое изменение в генетическом материале, даже единичную генетическую мутацию. Метод ПЦР был открыт в 1984 г американским биохимиком Кэри Мюллисом, который впервые показал возможность амплификации (многократного увеличения числа копий) участков ДНК в пробирке в процессе реакции (8). В 1993 г. за открытие метода ПЦР К. Мюллис был награжден Нобелевской премией. Синтез копий молекул ДНК in vivo (полимеразная реакция) происходит во всех организмах во время клеточного деления. Копирование ДНК осуществляют ферменты (ДНК-полимеразы). ПЦР это получение множества копий специфического фрагмента ДНК в пробирке (in vitro). В настоящее время ПЦР широко используется в различных областях: как в научных исследованиях, так и в клинической медицинской практике. Проведение ПЦР на матрице ДНК Метод ПЦР основан на 3-х этапном циклическом процессе, в результате которого многократно увеличивается количество специфического фрагмента ДНК. Рассмотрим механизм протекания ПЦР. Каждый цикл ПЦР состоит из трех стадий или трех шагов: денатурации (94-95 о С), отжига (гибридизации) праймеров (50-60 о С), полимеризации или элонгации (удлинения) цепи ДНК (72 о С). Денатурация. Во время денатурации под действием высокой температуры (94 95 о С) происходит «расплавление» двуцепочечной ДНК, то есть цепи ДНК разделяются, и ДНК переходит в однонитевую форму. Таким образом, освобождается место для «посадки» или гибридизации праймеров. Денатурация (94 95 о С) двуцепочечная ДНК «расплавленная» двуцепочечная ДНК Отжиг (гибридизация) праймеров. При понижении температуры до «температуры отжига» о С специфические одноцепочечные участки ДНК (праймеры) гибридизуются с комплементарным участком матрицы (исходной, расплавленной ДНК), то есть образуют двунитевую ДНК. Праймеры синтезируются химическим путем и ограничивают исследуемый специфический участок ДНК. В молекулярной биологии гибридизацию праймеров на специфическом участке ДНК называют отжигом. Каждый праймер гибридизуется на двух цепях ДНК таким образом, что -гидроксильные концы праймеров, которые способны удлиняться, направлены навстречу друг другу. После гибридизации праймеры строго ограничивают специфический участок ДНК.

2 отжиг праймеров (50 60 о С) Праймер В «расплавленная» двуцепочечная ДНК Праймеры подбираются с помощью компьютерных программ. Основным критерием подбора праймеров является комплементарность матрице, особенно важна полная комплементарность 2-3 нуклеотидов на -конце праймеров (10). Важным фактором, влияющим на эффективность и специфичность амплификации, является подбор оптимальной температуры "отжига" праймеров на матрице. Данная температура зависит от длины праймеров и их CG-состава. Для олигонуклеотидов, длинной оснований используется эмпирическая формула, позволяющая рассчитать оптимальную температуру "отжига" праймеров: T ( 0 C) = 4(G+C) + 2 (A+T) 3 где A,T,G,C число соответствующих нуклеотидов в одном праймере. Полимеризация или элонгация. При повышении температуры до 72 о С создаются оптимальные условия для эффективной работы термостабильной ДНК-полимеразы. В процессе элонгации происходит реакция, осуществляемая термостабильной ДНКполимеразой (9). ДНК-полимераза связывается с участком ДНК, в котором одна из цепей непрерывна (матрица), а другая заканчивается -концом и содержит -гидроксил, необходимый для продолжения цепи (праймер). После этого, фермент, в комплексе с матрицей и праймером, связывает соответствующий следующему нуклеотидному звену матрицы субстрат и катализирует реакцию его присоединения. Полимеризация (72 0 С) ДНК-полимераза Праймер В ДНК-полимераза dntps Химическая реакция, обеспечивающая данный процесс, заключается в конденсации растущей цепи ДНК с очередным субстратом. Субстратом полимеразной реакции являются 4 дезоксинуклеотидтрифосфата (dntp). 2

3 (pdn) n + P 3 dn = (pdn) n+1 + PP i где (pdn) n растущая цепь ДНК, P 3 dn dntp (дезоксинуклеотидтрифосфат), (pdn) n+1 цепь ДНК, удлиненная на один нуклеотид, PP i пирофосфат. Доказательство этой химической схемы, а также выделение первой ДНК-полимеразы осуществил А. Корнберг с сотрудниками. Следующий цикл реакции начинается денатурацией полученной ДНК. В этом случае получается в два раза больше молекул, на которых будут гибридизоваться праймеры. Серия повторяющихся циклов позволяет получить экспоненциальное накопление фрагмента ДНК. В идеальном случае, наработка специфического фрагмента подчиняется закону 2 n -2n раз, где n число циклов, а 2n продукт неопределенной длины, полученный в каждом цикле с исходной матрицы ДНК. После проведения циклов происходит увеличение фрагмента в раз. Длина фрагмента, нарабатывающегося в ПЦР, равна сумме длин двух праймеров плюс расстояние на ДНК-матрице между праймерами. Термостабильные ДНК-полимеразы Термостабильные ферменты выделяют из термофильных бактерий, температурный оптимум для полимеризации С. Точно не установлено к какому типу полимераз относятся термостабильные ДНК-полимеразы. Это белки, по молекулярной массе приближающиеся к кда. По этой характеристике, данные ферменты приближаются к ДНК-полимеразам I типа или к ДНК-полимеразам α-типа. Термостабильные ферменты, в большинстве своём обладают 5'-3'экзонуклеазной активностью. Считают, что первая термостабильная ДНК-полимераза была выделена из штамма термофильной бактерии Thermus aquaticus YTl (Taq ДНК-полимераза) (7). Однако мало кто знает, что в 1980 г. термостабильная ДНК полимераза была описана и выделена в России С. Городецким (5). В амплификации наиболее часто используются Taq ДНК-полимераза и Tth ДНКполимераза (10). В настоящее используют множество термостабильных ДНК-полимераз, которые имеют различные свойства. Проведение ОТ-ПЦР на матрице РНК Метод ОТ-ПЦР это модификация метода ПЦР. ОТ-ПЦР используют для выявления молекул РНК. Метод возник как последовательное проведение двух реакций. В ходе первой стадии обратной транскрипции с помощью одного праймера, комплементарного исследуемой РНК, субстратов реакции (dntps) и матрицы РНК происходит ферментативный синтез копий ДНК (кднк) с матрицы РНК. Вторая стадия это классическая ПЦР, которую мы подробно описали ранее. Реакция обратной транскрипции РНК Мезофильная ревертаза Полимеразная цепная реакция 3

4 Первую стадию проводят с использованием мезофильной ревертазы (фермента, синтезирующего кднк на матрице РНК). Существенной проблемой использования РНК в качестве матрицы является наличие сложной вторичной структуры молекул РНК. Некоторые исследователи используют вещества, дестабилизирующие молекулу РНК: метилртуть или диметилсульфоксид (DМSO). Однако добавление таких веществ может снизить эффективность синтеза и амплификации кднк. Другой подход повышение температуры обратной транскрипции выше 42 0 С, следовательно, использование термостабильных ферментов (2). ОТ-ПЦР можно проводить как в различных пробирках (в две стадии), так и в одной пробирке (совмещенную ОТ-ПЦР) без существенной потери чувствительности. ПЦР и ОТ-ПЦР проводят в приборах, называемых амплификаторами или термоциклерами. В настоящее время существует множество моделей. На рисунке 1 изображены две модели: четырехблоковый «Терцик» отечественного производства и «Hibaid» - английский амплификатор, состоящий из двух блоков. Рисунок 1. Примеры амплификаторов отечественного и зарубежного производства. Детекция результатов ПЦР или ОТ/ПЦР Существует несколько способов детекции (или просмотра) результатов ПЦР. Самым простым и удобным методом является электрофорез. Электрофорез проводится в агарозном или полиакриламидном гелях, содержащих бромистый этидий (химический агент, который связывается с двойной цепью ДНК и светится под действием ультрафиолетового света). Иногда вместо бромистого этидия гель окрашивают ионами серебра (3). После проведения ПЦР, продукты реакции могут быть дополнительно обработаны рестрикционными эндонуклеазами (ферментами, разрезающими ДНК в строго определенных местах) и анализированы методом электрофореза. Такой метод часто используется авторами работ по генетике. Иногда в ПЦР используют биотинилированые праймеры. Меченые биотином ПЦРпродукты переносят на твердый носитель (мембрану) к ней добавляют авидинпероксидазный комплекс. Затем проводят цветную пероксидазную реакцию с субстратом. Количество амплификата определяют по интенсивности цветной реакции. Такой метод аналогичен детекции при постановке иммуноферментного анализа. Праймеры можно модифицировать, используя различные флуоресцентные красители. Тогда, после проведения ПЦР, продукты реакции можно анализировать с использованием флуориметрии. Результаты ПЦР можно также контролировать колориметрированием (6). Широко применяется подход, основанный на молекулярной гибридизации. В этом случае применяют специфические химически модифицированные праймеры или зонды (см. ПЦР в реальном времени). Модификации ПЦР «Гнездовая» ( nested ) ПЦР используется для детекции ДНК в следовых количествах (1-100 копий на пробу). Праймеры для «гнездовой ПЦР» подбираются таким образом, чтобы места гибридизации праймеров для второй ПЦР находились внутри участка ДНК, ограниченного праймерами для первой ПЦР. Таким образом, специфический продукт первой ПЦР может служить матрицей во второй ПЦР, а неспецифические продукты, если они образуются в течение первой реакции, выступать в роли матрицы во второй ПЦР не могут. «Гнездовая ПЦР» требует для выполнения анализа несколько большего времени, но позволяет добиться повышения чувствительности и специфичности анализа. ПЦР с горячим стартом ( Hot start PCR) применяется для уменьшения неспецифического праймирования в ходе приготовления реакционной смеси при комнатной температуре. Один из компонентов реакции добавляют к реакционной смеси только после нагревания до 95 0 С, либо создают между компонентами механическую 4

5 преграду (восковую мембрану). После нагревания до 95 0 С мембрана расплавляется, компоненты смешиваются и начинается реакция. Альтернативой является использование модифицированных полимераз или моноклональных антител к ДНК-полимеразе. При этом существенного повышения специфичности не происходит, а выход продукта может быть несколько повышен. ПЦР с плавным снижением температуры отжига ( Touch down PCR) проводит таким образом, что в первых циклах температура отжига праймеров несколько превышает расчетную, снижая вероятность неспецифического связывания праймеров. Обогащение реакционной смеси специфической матрицей позволяет в последующих циклах снизить температуру отжига на С и получить значительное количество конечного продукта ПЦР. Градиентный ПЦР ( Gradient PCR) представляет собой модификацию предыдущей методики, в котором создается линейный градиент температуры отжига с использованием термоциклера. Протяженный ПЦР ( Long PCR) применяется для амплификации протяженных участков ДНК (более 5000 пар оснований). Обычно используют смесь ДНК-полимераз или ДНК полимеразу с особыми свойствами, в реакционную смесь добавляют дополнительные специфические компоненты. Также существенно увеличивается время элонгации. ПЦР непосредственно в ткани, в клетке ( In situ PCR) позволяет изучать процессы внутриклеточного размножения и развития вирусов. Выявление продукта обычно проводится методом гибридизации, при этом маркер, связывающий флуоресцентный краситель в ходе анализа, входит в состав праймеров. ПЦР от одной клетки ( Singl-cell PCR) исследует материал. Полученный от одной клетки методами микроманипуляций. Применяется в экспериментах по генетике человека и животных, в пренатальной диагностике. Компоненты реакционной смеси: Реакционная смесь для ПЦР состоит из следующих компонентов, которые обязательно должны быть добавлены в пробирку: 1) термостабильного фермента ДНК-полимеразы, 2) двух олигонуклеотидных праймеров (обычно 20 нуклеотидов длиной) подобранных на специфический участок ДНК, который необходимо копировать, 3) четырех дезоксирибонуклеотидов (dntps) 4) ДНК или РНК, выделенных из клинического образца 5) набора солей определенной кислотности (буферная система), в которой ДНКполимераза эффективно работает. Обязательно содержит ионы Mg 2+. Как показали исследования, состав реакционной смеси необходимо подбирать в каждом конкретном случае (10). Ионный состав и рн реакционного буфера необходимо подбирать так, чтобы активность термостабильной ДНК-полимеразы, используемой в реакции, была максимальной (1). Значение рн для различных термостабильных ДНК-полимераз должно находиться в интервале , значение ионной силы Обычно, используют 0,04 0,25 мм концентрацию каждого dntp. Увеличение концентрации dntp до 1 1,2 мм снижает активность фермента на 30%. Концентрация ионов Mg 2+ оказывает существенное влияние на активность термостабильных ДНК-полимераз. Наличие в ДНКматрице примесей хелатирующих агентов могут привести к снижению концентрации свободных ионов Mg 2+ и, тем самым к снижению эффективности ПЦР. При суммарной концентрации dntps мм, оптимальная концентрация этого иона 1,5-2 мм, повышение концентрации ионов Mg 2+ до 10 мм снижает активность Taq ДНКполимеразы на 50%. Необходимо отметить, что при проведении реакции обратной транскрипции можно использовать в качестве двухвалентного иона как Mg 2+, так и Мn 2+ (4). Обычно, применяемая концентрация праймеров мкм. Высокая концентрация праймеров может приводить к образованию "праймерных димеров". Для стабилизации 5

6 фермента некоторые исследователи рекомендуют использовать 10% диметилсульфоксид (DMSO). Однако, высокие концентрации DMSO (больше 10%) могут снижать активность Taq ДНК-полимеразы почти на 50%. Для повышения эффективности гибридизации ДНК (РНК) и праймера можно использовать тетраметиламмонийхлорид (ТМАК), при этом ингибирование ДНК-полимеразы не наблюдается. Преимущества метода ПЦР Чувствительность Специфичность Возможность дифференциальной штаммовой диагностики Возможность быстрой диагностики возбудителя Литература 1. Glukhov, A. I., Trofimova, M. E., Gordeev, S. A., Grebennikova, T. V., Vinogradov, S. V., Kiselev, V. I., Kramarov, V. M. // PCR amplification of phage lambda DNA sequences using thermostable DNA Polymerase Molecular Biology, V. 25, p Glukhov, A. I., Grebennikova, T. V., Kiselev, V. I., Severin, E. S.// Detection of CD-4 Receptor mrna by Combined Reverse transcription and Amplification Using Thermus Thermophilus DNA Polymerase Molecular Biology, V. 29, N. 4, part 2, p Gottlib M. и Сhavko M.// Silver Staining of Native and Denatured Eucariotic DNA in Agaros Gels. Analit. Biochem. 1987, V. 165, P Grebennikova, T. V., Glukhov, A. I., Chistyakova, L. G., Kiselev, V. I., Severin, E. S. //Detection of Interleukin-2α and Determination of MDR-1 Gene Expression by Combined Reverse transcription and Amplification Using Thermus Thermophilus DNA Polymerase Molecular Biology, V. 29, N. 4, part 2, p Kaledin A. S., Slusarenko A. G. and Gorodetskii S. I. // Isolation and properties of DNA polymerase from the extremely thermophilic bacterium Thermus ruber. - Biokhimiya , V. 47, P Kemp D. J., Smith D. B., Foot S. J., Samaras N., and Peterson M. G.// Colorimetric detection of spesific DNA segment amplified by polymerase chain reaction. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989, V. 86, P Lawyer F. С., Stoffer S., Saiki R. K., Myambo K, Drummond R., Gelfand D. M. // Isolation, characterization and expression in Escherichi Coli of the DNA polymerase gene from Thermus aquaticus. - J. Biol. Chem , V. 264, P Mullis K. B. And Falloona F. A.// Specific synthesis of DNA in vitro a Polymerase- Catalysed Chain Reaction. Method in Ensymol. 1987, V. 155, P Saiki R. K., Glcand D. N., Staffer S., Scharf S. J., Hindchi R., Horn G. T., Mullis K. B.// primer-directed Enzymatic amplification of DNA with Thermostable DNA Polymerase. Sciens. 1988, V. 293, P Viljoen G., J., Nel L. H., Crowther J. R. // Molecular diagnostic PCR Handbook IAEA. 6

7 Рисунок 1. 7

Рекомендации по постановке ПЦР

Рекомендации по постановке ПЦР Рекомендации по постановке ПЦР К наборам реактивов ## PK101, PK121. К полимеразам ## PK002S/L, PK013, PK014, PK015, PK016, PK022, PK123S/L. К готовым смесям для ПЦР ## PK041S/L, PK143S/L, PK145S/L, PK147S/L,

Подробнее

Глава 11 Методы анализа генов

Глава 11 Методы анализа генов Глава 11 Методы анализа генов 1. CS Ферменты рестрикции: a) используются в ПЦР; b) узнают одноцепочечную ДНК; c) узнают и разрезают специфические двуцепочечные последовательности ДНК; d) встречаются у

Подробнее

Encyclo Plus PCR kit

Encyclo Plus PCR kit Encyclo Plus PCR kit Набор реактивов Номер по каталогу PK101 Инструкция по применению Набор реактивов Encyclo Plus PCR kit предназначен только для исследовательских работ, выполняемых профессионально подготовленными

Подробнее

ПЦР в реальном времени

ПЦР в реальном времени ПЦР в реальном времени Одним из самых современных вариантов ПЦР является ПЦР в реальном времени(3). Название отражает общий смысл новой модификации. ПЦР в реальном времени основана на количественной детекции

Подробнее

Занятие 7. СОВРЕМЕННЫЕ МОЛЕКУЛЯРНО- БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ДНК. Цель занятия: ознакомиться с основными молекулярнобиологическими

Занятие 7. СОВРЕМЕННЫЕ МОЛЕКУЛЯРНО- БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ДНК. Цель занятия: ознакомиться с основными молекулярнобиологическими Занятие 7. СОВРЕМЕННЫЕ МОЛЕКУЛЯРНО- БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ДНК Цель занятия: ознакомиться с основными молекулярнобиологическими методами анализа ДНК. 1. Определение нуклеотидной последовательности

Подробнее

МЕТОДЫ АНАЛИЗА ГЕНОВ

МЕТОДЫ АНАЛИЗА ГЕНОВ 12 МЕТОДЫ АНАЛИЗА ГЕНОВ Гены являются молекулярным субстратом наследственности. Структура и локализация генов в геноме определяет свойства организма. При функционировании генома и в результате взаимодействия

Подробнее

Комплексное решение для молекулярных исследований

Комплексное решение для молекулярных исследований Комплексное решение для молекулярных исследований Ведерников Виталий Евгеньевич, к.б.н., руководитель группы ПЦР Лаборатории молекулярной диагностики ООО «Вега» ГК «Алкор Био» http://forpcr.ru Taq M Hot-Start

Подробнее

БИОИНЖЕНЕРИЯ. Сергей Лукьянов Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН. Лекция 3

БИОИНЖЕНЕРИЯ. Сергей Лукьянов Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН. Лекция 3 БИОИНЖЕНЕРИЯ Сергей Лукьянов Институт биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН Лекция 3 Полимеразная Цепная Реакция (ПЦР) Молекулярное клонирование 1 Объединение вектора

Подробнее

Tornado Taq-полимераза (hot-start)

Tornado Taq-полимераза (hot-start) Tornado Taq-полимераза (hot-start) Tornado Taq-полимераза является уникальным ферментом, обладающим повышенной термостабильностью, устойчивостью к ингибиторам ПЦР и повышенной скоростью синтеза ДНК по

Подробнее

Гибридизация нуклеиновых кислот

Гибридизация нуклеиновых кислот Гибридизация нуклеиновых кислот Гибридизация нуклеиновых кислот T m температура плавления Методы, основанные на гибридизации нуклеиновых кислот Хорошо охарактеризованная ДНК или олигонуклеотидные фрагменты

Подробнее

ТЕХНОЛОГИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ДНК

ТЕХНОЛОГИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ДНК 11 ТЕХНОЛОГИЯ РЕКОМБИНАНТНЫХ ДНК Расшифровывая тайны структуры генов, ученые начали их выделять и синтезировать. 30 лет назад тех, которые верили в успех этих начинаний было мало, и никто даже не предполагал

Подробнее

Устройство и правила работы ПЦР-лаборатории Урынбаева А.А. ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ Уфа, Россия

Устройство и правила работы ПЦР-лаборатории Урынбаева А.А. ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ Уфа, Россия Устройство и правила работы ПЦР-лаборатории Урынбаева А.А. ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ Уфа, Россия The device and rules of work of PTsR-laboratory Urynbayeva A.A. The Bashkir State Agrarian University Ufa,

Подробнее

Молекулярная диагностика инфекционных и инвазионных заболеваний животных.

Молекулярная диагностика инфекционных и инвазионных заболеваний животных. Молекулярная диагностика инфекционных и инвазионных заболеваний животных. д. б. н. Гребенникова Т. В. ГУ НИИ Вирусологии им. Д. И. Ивановского НПО НАРВАК Метод полимеразной цепной реакции Метод множественной

Подробнее

Набор реактивов MMLV RT kit

Набор реактивов MMLV RT kit Набор реактивов MMLV RT kit Номер по каталогу SK021 Инструкция по применению Набор реактивов MMLV RT kit предназначен только для исследовательских работ, выполняемых профессионально подготовленными пользователями.

Подробнее

Так вот ты какой горячий старт

Так вот ты какой горячий старт Так вот ты какой горячий старт Сразу хотим обратить Ваше внимание, что предлагаемая статья не является научной публикацией, а представляет собой обобщение нашего опыта по работе с полимеразами и подбору

Подробнее

Готовые решения для лабораторной диагностики молекулярными методами. Каширина Мария Молекулярный биолог ЗАО «БиоХимМак»

Готовые решения для лабораторной диагностики молекулярными методами. Каширина Мария Молекулярный биолог ЗАО «БиоХимМак» Готовые решения для лабораторной диагностики молекулярными методами Каширина Мария Молекулярный биолог ЗАО «БиоХимМак» Исследование фрагментов нуклеиновых кислот (ДНК или РНК) Основные этапы: В клетке

Подробнее

Инструкция по применению. набора реагентов для проведения количественного ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени

Инструкция по применению. набора реагентов для проведения количественного ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени Инструкция по применению набора реагентов для проведения количественного ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (2Х премикс для ПЦР-РВ) Комплектация: Компонент На 200 реакций Объем реакции

Подробнее

Молекулярная диагностика возбудителей заболеваний картофеля

Молекулярная диагностика возбудителей заболеваний картофеля Молекулярная диагностика возбудителей заболеваний картофеля Владимир Карандашов, к.б.н. Руководитель лаборатории диагностики фитопатогенов ООО «Исследовательский центр «ФитоИнженерия» Московская область,

Подробнее

Современные методы определения скрытой фитозараженности семенного картофеля

Современные методы определения скрытой фитозараженности семенного картофеля РУП «НПЦ НАН Беларуси по картофелеводству и плодоовощеводству» Современные методы определения скрытой фитозараженности семенного картофеля Радкович Елена Викторовна - заведующий лабораторией иммунодиагностики

Подробнее

Ключевые методы молекулярной биологии. Секвенирование по Сенгеру. Докладчик: Шадрин Д.М.

Ключевые методы молекулярной биологии. Секвенирование по Сенгеру. Докладчик: Шадрин Д.М. Ключевые методы молекулярной биологии. Секвенирование по Сенгеру Докладчик: Шадрин Д.М. 1 История разработки метода Фридрих Мишер Николай Открытие ДНК Константинович 1869 год. Кольцов Структура ДНК, 1927

Подробнее

Методы изучения РНК. Изучение регуляторных участков ДНК. Прикладное применение NGS

Методы изучения РНК. Изучение регуляторных участков ДНК. Прикладное применение NGS Методы изучения РНК. Изучение регуляторных участков ДНК. Прикладное применение NGS 1. Молекулярные методы Анализ РНК можно проводить по следующим категориям: первичная структура (последовательность нуклеотидов),

Подробнее

Методы работы с ДНК. ПЦР Рестрикция

Методы работы с ДНК. ПЦР Рестрикция Методы работы с ДНК ПЦР Рестрикция Рестрикция ДНК - Разрезание молекулы ДНК в определенной последовательности Рестриктазы 1. Узнают определенные последовательности в ДНК 2. Разрезают молекулу ДНК в определенных

Подробнее

Полимеразная цепная реакция. Принцип метода. Требования к инфраструктуре

Полимеразная цепная реакция. Принцип метода. Требования к инфраструктуре Полимеразная цепная реакция. Принцип метода. Требования к инфраструктуре Тренинг «Использование методики Xpert MTB/RIF», г.душанбе, 29 июля 2 августа 2013 г. Презентация подготовлена в рамках проекта USAID

Подробнее

Набор А м п л и ф и к а ц и я ДНК

Набор А м п л и ф и к а ц и я ДНК 1 1997-2010 ЗАО "Силекс " тел.: (495) 998 42 88 тел.: (495) 737 42 24 факс: (495) 737 42 24 Эл.почта: info@sileks.com Интернет: www.sileks.com Набор А м п л и ф и к а ц и я ДНК Состав набора: 1. Реакционный

Подробнее

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Заместитель министра Главный государственный санитарный врач О.В.Арнаутов 24 декабря 2010 г. Регистрационный 096-0710 МОЛЕКУЛЯРНЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Подробнее

Набор "О п т и м и з а ц и я П Ц Р"

Набор О п т и м и з а ц и я П Ц Р 1 1997-2005 ЗАО "Силекс" тел.: (095) 737 42 24, 998 42 88, факс: (095) 737 42 24 Интернет: www.sileks.com эл.почта: info@sileks.com Набор "О п т и м и з а ц и я П Ц Р" Набор предназначен для подбора оптимальных

Подробнее

Encyclo PCR kit. Набор реактивов. Номер по каталогу PK001. Инструкция по применению

Encyclo PCR kit. Набор реактивов. Номер по каталогу PK001. Инструкция по применению Encyclo PCR kit Набор реактивов Номер по каталогу PK001 Инструкция по применению Набор реактивов Encyclo PCR kit предназначен только для исследовательских работ, выполняемых профессионально подготовленными

Подробнее

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ БИОЛОГИЯ ГЕНОМНОЙ И ПОСТГЕНОМНОЙ ЭРЫ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ БИОЛОГИЯ ГЕНОМНОЙ И ПОСТГЕНОМНОЙ ЭРЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ БИОЛОГИЯ ГЕНОМНОЙ И ПОСТГЕНОМНОЙ ЭРЫ Лекция 5 ОСНОВЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БИОЛОГИИ РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА Лекция 19. Геномика /автор Янковский Н.К., МФТИ, 2008 http://bio.fizteh.ru/student/files/biology/biolections/lection19.html

Подробнее

«Автоматизация процесса пробоподготовки в ПЦР анализе»

«Автоматизация процесса пробоподготовки в ПЦР анализе» «Автоматизация процесса пробоподготовки в ПЦР анализе» Яцун Екатерина «Актуальные проблемы современной лабораторной диагностики» г. Барнаул, июнь 2010 г. Полимеразная цепная реакция (ПЦР): общие принципы

Подробнее

Введение в ПЦР и методы, основанные на ПЦР. Прикладная генетика для зоологов, лекция 3 Мюге Н.С.

Введение в ПЦР и методы, основанные на ПЦР. Прикладная генетика для зоологов, лекция 3 Мюге Н.С. Введение в ПЦР и методы, основанные на ПЦР Прикладная генетика для зоологов, лекция 3 Мюге Н.С. Введение в ПЦР и методы основанные на ПЦР: микросателиты (STR), AFLP, RAPD, PCR-RFLP, Inter-SINE PCR и т.п.

Подробнее

ПРОЦЕССИНГ ДНК И РНК 1. Репликация (от ДНК к ДНК) 2. Транскрипция (от ДНК к РНК)( 3. Трансляция (от РНК к белку) 4. Обратная транскрипция

ПРОЦЕССИНГ ДНК И РНК 1. Репликация (от ДНК к ДНК) 2. Транскрипция (от ДНК к РНК)( 3. Трансляция (от РНК к белку) 4. Обратная транскрипция ПРОЦЕССИНГ ДНК И РНК При жизни организма непрерывно происходят процессы обновления тканей, клеток и т.д., которые неизбежно включают процессы копирования и передачи информации, хранящейся в геноме. Направления

Подробнее

Генетическая инженерия

Генетическая инженерия *Генная Инженерия Генетическая инженерия Генетическая инженерия (генная инженерия) совокупность приёмов, методов и технологий получения рекомбинантных РНК и ДНК, выделения генов из организма (клеток),

Подробнее

Инструкция по применению

Инструкция по применению Министерство здравоохранения Республики Беларусь УТВЕРЖДАЮ Заместитель министра здравоохранения Главный государственный санитарный врач 12 апреля 2005 г. Регистрационный 211 1203 М.И. Римжа ИНСТРУКЦИЯ

Подробнее

Температура, при которой каталитическая активность фермента максимальна, называется его температурным оптимумом.

Температура, при которой каталитическая активность фермента максимальна, называется его температурным оптимумом. скорость реакции, мкмоль/мин ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 10 20 30 40 50 60 70 температура, градусы Цельсия Температура, при которой каталитическая активность фермента

Подробнее

3. Область применения. Методика предназначена для использования в научноисследовательских и диагностических учреждениях ветеринарного профиля.

3. Область применения. Методика предназначена для использования в научноисследовательских и диагностических учреждениях ветеринарного профиля. 1. Введение Вирус гриппа является возбудителем острых респираторных заболеваний у человека и животных. Он принадлежит к семейству Orthomyxoviridae. Существует три типа вируса гриппа: A, B, C. Вирус типов

Подробнее

Экзаменационный билет 2. Проф. Левашов Андрей Вадимович Проф. Копылов Алексей Михайлович К.х.н. Федорчук Владимир Витальевич

Экзаменационный билет 2. Проф. Левашов Андрей Вадимович Проф. Копылов Алексей Михайлович К.х.н. Федорчук Владимир Витальевич Экзаменационный билет 1. 1. Функции, структура и свойства биологических мембран. 2. Стационарная кинетика ферментативных реакций. Схема Михаэлиса-Ментен. Методы определения параметров из экспериментальных

Подробнее

Диагностика ВГЦ. Денис Годлевский Баку, Декабрь 2014

Диагностика ВГЦ. Денис Годлевский Баку, Декабрь 2014 Диагностика ВГЦ Денис Годлевский Баку, Декабрь 2014 Виды диагностики Лабораторная Экспресс-диагностика Темы Антитела/ Неструктурные белки Полимеразная цепная реакция (ПЦР) Генотипирование Фибросканирование

Подробнее

Обратная транскрипция (ОТ) и обратная транскрипция совмещенная с полимеразной цепной реакцией (ОТ-ПЦР)

Обратная транскрипция (ОТ) и обратная транскрипция совмещенная с полимеразной цепной реакцией (ОТ-ПЦР) 2002-2009 ЗАО "Силекс" тел.: (495) 998 42 88 тел.: (495) 737 42 24 факс: (495) 737 42 24 Эл.почта: info@sileks.com Интернет: www.sileks.com Обратная транскрипция (ОТ) и обратная транскрипция совмещенная

Подробнее

Введение в молекулярную биологию (для информатиков) Александр Предеус Институт биоинформатики

Введение в молекулярную биологию (для информатиков) Александр Предеус Институт биоинформатики Введение в молекулярную биологию (для информатиков) Александр Предеус Институт биоинформатики Урок 1.1 Основные концепции молекулярной биологии молекулы, составляющие клетку биополимеры: ДНК, РНК, протеины

Подробнее

ДНК - Технология ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ

ДНК - Технология ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ МОСКВА 1998 2 Введение...3 1. Перспективы практического использования ПЦР-диагностики...5 2. Механизм полимеразной цепной реакции...6 2.1. Компоненты реакционной

Подробнее

Методы исследования нуклеиновых кислот

Методы исследования нуклеиновых кислот Методы исследования нуклеиновых кислот Что можно исследовать? Первичная последовательность НК Одна из фундаментальных задач молекулярной биологии и биохимии Определенные мутации Пренатальная диагностика

Подробнее

Цель занятия: ознакомиться с процессами репликации ДНК.

Цель занятия: ознакомиться с процессами репликации ДНК. Занятие 3. РЕПЛИКАЦИЯ ДНК Цель занятия: ознакомиться с процессами репликации ДНК. 1 Матричные процессы синтеза биополимеров. Белки и ферменты, участвующие в репликации ДНК. Общая характеристика репликации

Подробнее

Ключевые слова: нуклеозиды, нуклеотиды, нуклеиновые кислоты, модифицированные нуклеозидтрифосфаты, аптамеры, органический синтез.

Ключевые слова: нуклеозиды, нуклеотиды, нуклеиновые кислоты, модифицированные нуклеозидтрифосфаты, аптамеры, органический синтез. Аннотация проекта (ПНИЭР), выполняемого в рамках ФЦП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 2020 годы» Номер Соглашения о предоставлении

Подробнее

Изотермическая амплификация ДНК. Воронина Е.Н.

Изотермическая амплификация ДНК. Воронина Е.Н. Изотермическая амплификация ДНК Воронина Е.Н. Найти иголку в стоге сена Нам нужно найти участок ДНК размером 300 нуклеотидов Разница в 30 000 000 раз В человеческом геноме размером 3 миллиарда нуклеотидов

Подробнее

Репликация процесс самовоспроизведения ДНК

Репликация процесс самовоспроизведения ДНК Репликация процесс самовоспроизведения ДНК Фрагмент полинуклеотидной цепи ДНК Фрагмент полинуклеотидной цепи ДНК Модель структуры ДНК Модель структуры ДНК 5 3 3 5 3 5 Розалинда Франклин (1920-1958) Дж.Уотсон

Подробнее

Применение метода гнездовой пцр в одной пробирке для диагностики краснухи

Применение метода гнездовой пцр в одной пробирке для диагностики краснухи Г.В. Семейко,М.А. Ермолович,Е.О. Самойлович Применение метода гнездовой пцр в одной пробирке для диагностики краснухи НИИ эпидемиологии и микробиологии МЗ РБ Для дифференциации краснухи среди других острых

Подробнее

Тема: «Нуклеиновые кислоты. ДНК»

Тема: «Нуклеиновые кислоты. ДНК» Глава I. Основы цитологии На дом: 12 Тема: «Нуклеиновые кислоты. ДНК» Задачи: Дать характеристику нуклеиновым кислотам: видам НК, локализации их в клетке, строению, функциям. Изменено, дополнено Нуклеиновые

Подробнее

Анализ образцов пищевых продуктов на присутствие генетически модифицированных организмов. Сессия 9

Анализ образцов пищевых продуктов на присутствие генетически модифицированных организмов. Сессия 9 Анализ образцов пищевых продуктов на присутствие генетически модифицированных организмов Сессия 9 Качественная детекция кукурузы MON810, кукурузы Bt-176 и сои RoundupReady методом ПЦР М. Кверчи, М. Маретти,

Подробнее

Молекулярная биология

Молекулярная биология Молекулярная биология Курс лекций для студентов IV курса факультета биологии РГПУ им. А.И. Герцена Профессор кафедры Зоологии, д.б.н., профессор Цымбаленко Надежда Васильевна Т Р А Н С К Р И П Ц И Я (прокариоты)

Подробнее

Молекулярная биология

Молекулярная биология Молекулярная биология Курс лекций для студентов IV курса факультета биологии РГПУ им. А.И. Герцена Профессор кафедры Зоологии, д.б.н., профессор Цымбаленко Надежда Васильевна РЕПЛИКАЦИЯ ДНК лекции 3, 4

Подробнее

М.P.Кабилов 1, Г.М.Дымшиц 1, Д.В.Пышный 2, Е.М.Иванова 2, В.Ф.Зарытова 2, Н.М.Гашникова 3, А.Г.Покровский 3

М.P.Кабилов 1, Г.М.Дымшиц 1, Д.В.Пышный 2, Е.М.Иванова 2, В.Ф.Зарытова 2, Н.М.Гашникова 3, А.Г.Покровский 3 КОЛОРИМЕТРИЧЕСКАЯ ДЕТЕКЦИЯ ТОЧЕЧНЫХ МУТАЦИЙ ПРИ ИММОБИЛИЗАЦИИ ФРАГМЕНТА АНАЛИЗИРУЕМОЙ ДНК С ПРОДУКТОМ ЛИГИРОВАНИЯ НА НЕМ ТАНДЕМА КОРОТКИХ ОЛИГОНУКЛЕОТИДОВ М.P.Кабилов 1, Г.М.Дымшиц 1, Д.В.Пышный 2, Е.М.Иванова

Подробнее

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Первый заместитель министра Д.Л. Пиневич 30.09.2011 г. Регистрационный 064-0611 МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА МУТАЦИЙ В ОНКОГЕНЕ BRCA1

Подробнее

РАЗДЕЛ II ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ ОСНОВНЫЕ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

РАЗДЕЛ II ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ ОСНОВНЫЕ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ПОЛОЖЕНИЯ РАЗДЕЛ II ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ ОСНОВНЫЕ ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ПОЛОЖЕНИЯ Генная инженерия это отрасль молекулярной биологии и генетики, целью которой является получение с помощью лабораторных приемов организмов с новыми,

Подробнее

МЕТОД МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ СИНДРОМА ВНЕЗАПНОЙ МЛАДЕНЧЕСКОЙ СМЕРТИ

МЕТОД МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ СИНДРОМА ВНЕЗАПНОЙ МЛАДЕНЧЕСКОЙ СМЕРТИ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Первый заместитель министра здравоохранения 6 августа 2004 г. Регистрационный 174 1203 В.В. Колбанов МЕТОД МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ

Подробнее

Методы исследования нуклеиновых кислот. III. Секвенирование

Методы исследования нуклеиновых кислот. III. Секвенирование Методы исследования нуклеиновых кислот III. Секвенирование Секвенирование 1977 г. Maxam-Gilbert and Sanger Sequencing 2005 г. Next-Generation Sequencing Virus 3222 (Bacteriophage phix 174, 5386 пн 1977

Подробнее

Механизм транскрипции. 4 этапа: 1. Узнавание промотора 2. Инициация 3. Элонгация 4. Терминация

Механизм транскрипции. 4 этапа: 1. Узнавание промотора 2. Инициация 3. Элонгация 4. Терминация Механизм транскрипции 4 этапа: 1. Узнавание промотора 2. Инициация 3. Элонгация 4. Терминация РНК-полимераза прикрепляется неспецифически к ДНК 1 Закрытый двойной клмплекс Открытый промоторный комплекс

Подробнее

Набор «ФБиоГель» для выделения двунитевой ДНК из геля или очистки от реакционной смеси на центрифужных колонках. (НК-2-4, НК-2-50)

Набор «ФБиоГель» для выделения двунитевой ДНК из геля или очистки от реакционной смеси на центрифужных колонках. (НК-2-4, НК-2-50) Набор «ФБиоГель» для выделения двунитевой ДНК из геля или очистки от реакционной смеси на центрифужных колонках. (НК-2-4, НК-2-50) Содержание Компоненты набора... 3 Условия и срок хранения... 3 Ограничения

Подробнее

ПЦР-диагностика в России: современное состояние и перспективы развития

ПЦР-диагностика в России: современное состояние и перспективы развития ПЦР-диагностика в России: современное состояние и перспективы развития Лаптинов И.А. 1, Болдырева М.Н. 2 1 - ЗАО "НПФ ДНК-Технология" 115478 Москва, Каширское ш. д.24 корп. 2, к.222 тел. 116-4902 e-mail:

Подробнее

Набор для выявления вируса болезни Ньюкасла

Набор для выявления вируса болезни Ньюкасла Набор для выявления вируса болезни Ньюкасла (количественный) Вир-8-100, на 100 реакций 1 Содержание Компоненты набора... 3 Область применения... 3 Гарантия... 3 Описание... 4 Меры предосторожности... 4

Подробнее

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Заместитель министра здравоохранения Главный государственный санитарный врач Республики Беларусь О.В. Арнаутов 11 апреля 2011 г. Регистрационный

Подробнее

117587, Москва, Варшавское ш., д.125ж, к.6 Тел./факс +7 (495) Е-mail: Информация о наборе

117587, Москва, Варшавское ш., д.125ж, к.6 Тел./факс +7 (495) Е-mail:  Информация о наборе Набор реагентов для выявления РНК вируса гриппа А субтипа HN1 («птичьего гриппа») (Influenza A virus subtype HN1) методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) Назначение: Информация

Подробнее

НЕОБЫЧАЙНАЯ ИСТОРИЯ О ТОМ, КАК РОДИЛАСЬ ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ

НЕОБЫЧАЙНАЯ ИСТОРИЯ О ТОМ, КАК РОДИЛАСЬ ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ НЕОБЫЧАЙНАЯ ИСТОРИЯ О ТОМ, КАК РОДИЛАСЬ ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ В мире науки (Scientific American) Июнь N 6 1990 г. Кэри Б. Мюллис лауреат Нобелевской премии в области химии Этот удивительно простой

Подробнее

Продукт Кат. # Количество. pal2-t вектор TA мкг (на 25 реакций)

Продукт Кат. # Количество. pal2-t вектор TA мкг (на 25 реакций) pal2-t вектор Продукт Кат. # Количество pal2-t вектор TA002 1.25 мкг (на 25 реакций) Лиофильно высушенный продукт. Хранение: -20 C Транспортировка: комнатная температура (не более недели) либо -20 C Срок

Подробнее

ИНСТРУКЦИЯ VIBRIO СHOLERAE

ИНСТРУКЦИЯ VIBRIO СHOLERAE ИНСТРУКЦИЯ по применению комплекта реагентов для проведения ПЦРамплификации ДНК токсигенных штаммов холерного вибриона VIBRIO СHOLERAE ВНИМАНИЕ! Vibrio cholerae относится ко II группе патогенности. Все

Подробнее

Тема «Молекулярные механизмы генетических процессов. Генетическая роль ДНК и РНК, ее доказательство» РЕПОЗИТОРИЙ БГПУ

Тема «Молекулярные механизмы генетических процессов. Генетическая роль ДНК и РНК, ее доказательство» РЕПОЗИТОРИЙ БГПУ Тема «Молекулярные механизмы генетических процессов. Генетическая роль ДНК и РНК, ее доказательство» Молекулярная генетика - раздел генетики и молекулярной биологии, изучающий материальные основы наследственности

Подробнее

Белорусский государственный университет

Белорусский государственный университет Белорусский государственный университет «30» ноября 2016 г. Регистрационный УД - 3285 /уч. Технология рекомбинантных ДНК Учебная программа учреждения высшего образования по учебной дисциплине для специальности:

Подробнее

Основные генетические механизмы

Основные генетические механизмы Основные генетические механизмы Тренинг «Использование методики Xpert MTB/RIF», г.душанбе, 29 июля 2 августа 2013 г. Презентация подготовлена в рамках проекта USAID «Посилення контролю за туберкульозом

Подробнее

I. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД» 4 Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА» 5

I. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД» 4 Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА» 5 содержание I. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД» 4 Комплект реагентов для выделения ДНК «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА» 5 II. СОРБЕНТНЫЙ МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ ДНК Комплект

Подробнее

ДНК-ЗОНДЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ВИРУСОЛОГИИ Галина Я.С., Николаева О.Н. ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ Уфа, Россия

ДНК-ЗОНДЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ВИРУСОЛОГИИ Галина Я.С., Николаева О.Н. ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ Уфа, Россия ДНК-ЗОНДЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ВИРУСОЛОГИИ Галина Я.С., Николаева О.Н. ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ Уфа, Россия THE DNK-PROBES AND THEIR USE IN VIROLOGY Galina Y.S., Nikolaeva O.N. The Bashkir State Agrarian

Подробнее

Набор реагентов для выявления контаминации микоплазмой в культурах клеток Инструкция по применению

Набор реагентов для выявления контаминации микоплазмой в культурах клеток Инструкция по применению MycoReport Набор реактивов Номер по каталогу: MR001 Набор реагентов для выявления контаминации микоплазмой в культурах клеток Инструкция по применению Набор реактивов предназначен только для исследовательских

Подробнее

ПРИМЕНЕНИЕ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ ДЛЯ ВЫ- ЯВЛЕНИЯ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА В ПОЛЕВОМ И КЛИНИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ. Инструкция по применению

ПРИМЕНЕНИЕ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ ДЛЯ ВЫ- ЯВЛЕНИЯ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА В ПОЛЕВОМ И КЛИНИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ. Инструкция по применению МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Заместитель министра здравоохранения Главный государственный санитарный врач Римжа М.И. 28 декабря 2005 г. Регистрационный 193-1205 ПРИМЕНЕНИЕ

Подробнее

Молекулярная диагностика онкогематологических заболеваний. Филатова Людмила Менеджер по продукции К.б.н

Молекулярная диагностика онкогематологических заболеваний. Филатова Людмила Менеджер по продукции К.б.н Молекулярная диагностика онкогематологических заболеваний Филатова Людмила Менеджер по продукции К.б.н Сравнительные характеристики методик Метод Морфология FISH Проточная цитофлуориметри я ОТ-ПЦР (транслокации)

Подробнее

МОЛЕКУЛЯРНО- ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МЕТОД

МОЛЕКУЛЯРНО- ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МЕТОД P A R T N E R ' S P R E S E N T A T I O N МОЛЕКУЛЯРНО- ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МЕТОД Вороная Ю.М 1мед 1группа S E C T I O N F O U R МОЛЕКУЛЯРНО - ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ Большая и разнообразная группа методов, предназначенная

Подробнее

Тема: Молекулярные основы наследственности

Тема: Молекулярные основы наследственности Тема: Молекулярные основы наследственности План лекции: 1. Нуклеиновые кислоты классификация, строение, функции. 2. Макромолекулярная структура ДНК 3. РНК: виды, структура, функции Два вида НК: ДНК (хранение

Подробнее

Методические рекомендации для самостоятельной работы обучающихся по дисциплине. Сельскохозяйственная биотехнология

Методические рекомендации для самостоятельной работы обучающихся по дисциплине. Сельскохозяйственная биотехнология ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ОРЕНБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Методические рекомендации для самостоятельной

Подробнее

Mint RACE primer set

Mint RACE primer set Mint RACE primer set Набор праймеров для специфической амплификации концевых фрагментов кднк Номер по каталогу SK004 Инструкция по применению Набор реактивов Mint RACE primer set предназначен только для

Подробнее

Молекулярно-генетические методы в диагностике перинатальных инфекций

Молекулярно-генетические методы в диагностике перинатальных инфекций Молекулярно-генетические методы в диагностике перинатальных инфекций Кафарская Л.И., Ефимов Б.А., Шкопоров А.Н. Работа выполнена при финансовой поддержке Минобразования и науки Перинатальные инфекции Успешная

Подробнее

Репликация у бактерий

Репликация у бактерий Репликация у бактерий 1. Содержание курса Цель данного курса познакомить студентов с цитологией, биохимией, молекулярной биологией. Рис. 1: Репликационная вилка Молекулярная биология уровень, находящийся

Подробнее

Геном растений и современные методы его идентификации

Геном растений и современные методы его идентификации Геном растений и современные методы его идентификации Николай Фризен Ботанический Сад Университета Оснабрюк, Германия friesen@biologie.uni-osnabrueck.de ДНК - Дезоксирибонуклеиновая кислота ДНК макромолекула

Подробнее

КАТАЛОГ ОБОРУДОВАНИЯ

КАТАЛОГ ОБОРУДОВАНИЯ КАТАЛОГ ОБОРУДОВАНИЯ КОМПАНИЯ «ДНК-ТЕХНОЛОГИЯ» КАТАЛОГ ОБОРУДОВАНИЯ Москва 2017 1 СОДЕРЖАНИЕ ТЕКУЩИЕ ИЗМЕНЕНИЯ И ДОПОЛНЕНИЯ ВВЕДЕНИЕ О КОМПАНИИ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ТЕХНОЛОГИИ I. ПЦР СОВРЕМЕННЫЙ МЕТОД КЛИНИЧЕСКОЙ

Подробнее

ИССЛЕДОВАНИЯ ТЕПЛОВЫХ РЕЖИМОВ РАБОТЫ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ПЦР, НАПРАВЛЕННЫЕ НА УЛУЧШЕНИЕ ХАРАКТЕРИСТИК ПРИБОРОВ АНК-16/32

ИССЛЕДОВАНИЯ ТЕПЛОВЫХ РЕЖИМОВ РАБОТЫ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ПЦР, НАПРАВЛЕННЫЕ НА УЛУЧШЕНИЕ ХАРАКТЕРИСТИК ПРИБОРОВ АНК-16/32 ISSN 0868 5886, c. 46 53 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ УДК 547.963.32: 621.3.082.63 ª О. А. Леонтьева, А. И. Петров ИССЛЕДОВАНИЯ ТЕПЛОВЫХ РЕЖИМОВ РАБОТЫ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ПЦР, НАПРАВЛЕННЫЕ НА УЛУЧШЕНИЕ ХАРАКТЕРИСТИК

Подробнее

И.С. Ковтун, М.В. Ефимова

И.С. Ковтун, М.В. Ефимова Вестник Томского государственного университета. Биология. 2013. 2 (22). С. 160 171 УДК 581.1 И.С. Ковтун, М.В. Ефимова Биологический институт Томского государственного университета (г. Томск) Особенности

Подробнее

ɟ ɢɡɞɚɧɢɟ ɷɥɟɤɬɪɨɧɧɨɟ. 2013

ɟ ɢɡɞɚɧɢɟ ɷɥɟɤɬɪɨɧɧɨɟ. 2013 -... 4. 2013 УДК 577.21 ББК 28.04 П11 Авторы: Д. В. Ребриков, Г. А. Саматов, Д. Ю. Трофимов, П. А. Семёнов, А.М.Савилова, И.А.Кофиади, Д.Д.Абрамов Под общей редакцией Д. В. Ребрикова П11 ПЦР в реальном

Подробнее

Лекция 7. Нуклеиновые кислоты Структура ДНК Синтез ДНК Мутации Структура РНК

Лекция 7. Нуклеиновые кислоты Структура ДНК Синтез ДНК Мутации Структура РНК Лекция 7 Нуклеиновые кислоты Структура ДНК Синтез ДНК Мутации Структура РНК Нуклеиновые кислоты ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) ирнк (рибонуклеиновая кислота) линейные полимеры, мономерами которых

Подробнее

кг органического вещества и только около 1,3 кг (??) нуклеиновых кислот.

кг органического вещества и только около 1,3 кг (??) нуклеиновых кислот. Тело человека весом 70 кг, включает 42 кг воды + 28 кг органического вещества и только около 1,3 кг (??) нуклеиновых кислот. Вес (кг) Белки Липиды Минералы Нуклеиновые Полисахариды кислоты Объект Размер

Подробнее

УТВЕРЖДАЮ Зав. кафедрой молекулярной биологии и генетики, д.м.н. Топорков А.В. протокол 1 от «28» августа 2015 г.

УТВЕРЖДАЮ Зав. кафедрой молекулярной биологии и генетики, д.м.н. Топорков А.В. протокол 1 от «28» августа 2015 г. УТВЕРЖДАЮ Зав. кафедрой молекулярной биологии и генетики, д.м.н. Топорков А.В. протокол 1 от «28» августа 2015 г. Календарно - тематический план лекций по дисциплине «Методы и объекты генетического анализа»

Подробнее

Кафедра медицинской генетики СУСПИЦЫН ЕВГЕНИЙ НИКОЛАЕВИЧ ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДОВ МОЛЕКУЛЯРНОЙ ДИАГНОСТИКИ В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

Кафедра медицинской генетики СУСПИЦЫН ЕВГЕНИЙ НИКОЛАЕВИЧ ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДОВ МОЛЕКУЛЯРНОЙ ДИАГНОСТИКИ В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской

Подробнее

УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ. Институт биохимической технологии и нанотехнологии (ИБХТН)

УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ. Институт биохимической технологии и нанотехнологии (ИБХТН) БИЛЕТ 1 1. История развития биотехнологии и основные ее аспекты. 2. Рекомбинантные молекулы ДНК, их получение и использование. 3. Непрерывное культивирование микроорганизмов. Хемостатный метод культивирования.

Подробнее

Набор для выявления вирусов инфекционного ларинготрахеита и болезни Марека

Набор для выявления вирусов инфекционного ларинготрахеита и болезни Марека Набор для выявления вирусов инфекционного ларинготрахеита и болезни Марека (количественный) Вир-10-100, на 100 реакций 1 Содержание Компоненты набора... 3 Область применения... 3 Гарантия... 3 Описание...

Подробнее

РЕПЛИКАЦИЯ И РЕПАРАЦИЯ ДНК

РЕПЛИКАЦИЯ И РЕПАРАЦИЯ ДНК 7 РЕПЛИКАЦИЯ И РЕПАРАЦИЯ ДНК Репликация ДНК это молекулярный процесс точного копирования молекул ДНК (ее нуклеотидной последовательности). С помощью механизма репликации происходит точная передача генетической

Подробнее

«Химические основы биологических процессов» * Часть I. Текущие вопросы ТЕМА 1. Что такое жизнь с точки зрения химика. 1. Многообразие и систематика

«Химические основы биологических процессов» * Часть I. Текущие вопросы ТЕМА 1. Что такое жизнь с точки зрения химика. 1. Многообразие и систематика «Химические основы биологических процессов» * Часть I. Текущие вопросы ТЕМА 1. Что такое жизнь с точки зрения химика. 1. Многообразие и систематика 2. Строение клеток 3. Биологические полимеры три основных

Подробнее

«Использования технологий TECAN в автоматизации NAT-тестирования. Яцун Екатерина г. Ростов-на-Дону, октября 2010 г.

«Использования технологий TECAN в автоматизации NAT-тестирования. Яцун Екатерина г. Ростов-на-Дону, октября 2010 г. «Использования технологий TECAN в автоматизации NAT-тестирования Яцун Екатерина г. Ростов-на-Дону, 13-14 октября 2010 г. Актуальность В Европе с 1999 года ПЦР обязательный метод для тестирования всей донорской

Подробнее

Библиотека. NEBNext дцднк Fragmentase New England Biolabs

Библиотека. NEBNext дцднк Fragmentase New England Biolabs Библиотека NEBNext дцднк Fragmentase New England Biolabs Уникальный фермент NEBNext дцднк Fragmentase, заменяющий соникаторы и небулизаторы при пробоподготовке к секвенированию следующего поколения (NGS).

Подробнее

Резюме - краткое изложение информации по какому-либо изученному материалу. Необходимо изложить пройденную тему в 5-7 предложениях, используя термины.

Резюме - краткое изложение информации по какому-либо изученному материалу. Необходимо изложить пройденную тему в 5-7 предложениях, используя термины. Задания для внеаудиторной работы студентов специальности медицинская биохимия 1 курс. Резюме - краткое изложение информации по какому-либо изученному материалу. Необходимо изложить пройденную тему в 5-7

Подробнее

ГИПОТЕЗЫ И ФАКТЫ. А. В. ВЛАСОВ Эволюция в пробирке

ГИПОТЕЗЫ И ФАКТЫ. А. В. ВЛАСОВ Эволюция в пробирке ВЛАСОВ Александр Валентинович кандидат химических наук, научный сотрудник Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (Новосибирск) А. В. ВЛАСОВ Эволюция в пробирке Давняя мечта химиков

Подробнее

ИНСТРУКЦИЯ. по применению комплекта реагентов для ПЦР-амплификации геномной ДНК человека в режиме реального времени КВМ

ИНСТРУКЦИЯ. по применению комплекта реагентов для ПЦР-амплификации геномной ДНК человека в режиме реального времени КВМ ИНСТРУКЦИЯ по применению комплекта реагентов для ПЦР-амплификации геномной ДНК человека в режиме реального времени КВМ Регистрационное удостоверение МЗ СР РФ ФСР 2010/08412 ВНИМАНИЕ! Изучите инструкцию

Подробнее

Составляющие элементы процесса транскрипции РНК-полимераза + НТФ + ДНК-матрица РНК + ДНК-матрица + ФФн

Составляющие элементы процесса транскрипции РНК-полимераза + НТФ + ДНК-матрица РНК + ДНК-матрица + ФФн Составляющие элементы процесса транскрипции РНК-полимераза + НТФ + ДНК-матрица РНК + ДНК-матрица + ФФн = РНК-полимераза кор-фермент σ-фактор Ген Промотор ДНКматрица ω: восстанавливает РНК полимеразу обратно

Подробнее

Белок, содержащий Тест-система фрагментов. данный фрагмент 1 поколение с 100-3, NS4

Белок, содержащий Тест-система фрагментов. данный фрагмент 1 поколение с 100-3, NS4 С.В. Губкин, А.Л. Сычев, В.М. Мицура Преимущества метода ПЦР в сравнении с обнаружением антител к вирусу гепатита С при лабораторной диагностике вирусного гепатита С 3-я кафедра внутренних болезней БГМУ,

Подробнее

Глава 7 Репликация ДНК

Глава 7 Репликация ДНК Глава 7 Репликация ДНК 1. CS Репликация это процесс присущий: a) только эукариотам; b) только прокариотам; c) только вирусам; d) всем живым системам; e) все ответы неверные. 2. CS Репликация это процесс:

Подробнее

Анализ образцов пищевых продуктов на присутствие генетически модифицированных организмов. Сессия 6. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Анализ образцов пищевых продуктов на присутствие генетически модифицированных организмов. Сессия 6. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) Анализ образцов пищевых продуктов на присутствие генетически модифицированных организмов Сессия 6 Полимеразная цепная реакция (ПЦР) М.Сомма, М.Кверчи WORLD HEALTH ORGANIZATION REGIONAL OFFICE FOR EUROPE

Подробнее